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產(chǎn)品名稱:游離膽固醇(FC)含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):YS-01S6483
測(cè)定意義
膽固醇廣泛存在于動(dòng)物體內(nèi),尤以腦及神經(jīng)組織中最為豐富,在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也高。膽固醇是合成腎上腺皮質(zhì)激素、性激素、膽汁酸及維生素等生理活性物質(zhì)的重要原料,也是構(gòu)成細(xì)胞膜的主要成分,其血清濃度可作為脂代謝的指標(biāo)。動(dòng)脈粥樣硬化、靜脈血栓形成與膽石癥與高膽固醇血癥有密切的相關(guān)性。
測(cè)定原理
游離膽固醇在膽固醇氧化酶作用下生成△4-膽甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,經(jīng)過(guò)氧化物酶作用下生成紅色醌類化合物,其顏色深淺與FC含量成正比。
自備用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
丁酰膽堿脂酶抗體(C端) Anti-BCHECT 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
新生血清 200ml 四季青
ZNF266 英文名稱: 鋅指蛋白266抗體 0.2ml
DCL-1 英文名稱: C型凝集素受體CLEC13A抗體 0.1ml
丁酰膽堿脂酶抗體(C端) Anti-BCHECT 0.1ml
UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)
ZNF347 英文名稱: 鋅指蛋白347抗體 0.2ml
DAT1 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 0.2ml
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
ZADH1 英文名稱: 鋅結(jié)合乙醇脫氫酶結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 0.2ml
DYRK1A 英文名稱: 絲酸/蘇酸蛋白激酶MNB抗體 0.2ml
銜接蛋白β抗體 Anti-beta Adaptin/AP2 0.1ml
Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 膠體金離子標(biāo)記小鼠抗慶大霉素單克隆抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.5ml(35nm-40nm)
Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌受體β抗體 規(guī)格 0.1ml
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
游離膽固醇(FC)含量測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)氘代乙(25 mL )10-姜酚全組織組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和HRP二抗)
氘代乙(25g )石斛堿全組織組織化學(xué)HRP酶聯(lián)DAB直接檢測(cè)試劑盒(含HRP一抗)
氘代乙(50g )雷公藤內(nèi)酯酮全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)
氘代甲苯(5 g )異阿魏酸全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP間接檢測(cè)試劑盒(含AP二抗)
氘代甲苯(10 g )豆甾全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測(cè)試劑盒(含一抗和AP二抗)
氘代甲苯(25 g )芒柄花苷全組織組織化學(xué)AP酶聯(lián)NBT/BCIP直接檢測(cè)試劑盒(含AP一抗)
氘代酮(0.50mlx10)沒(méi)食子兒茶素全組織熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測(cè)試劑盒(無(wú)一抗和二抗)
氘代酮(0.50mlx10)牡荊素葡萄糖苷全組織熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒(含熒光二抗)
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。