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詳細(xì)介紹
【友情提示】：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失，請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明！
產(chǎn)品名稱：乙醛脫氫酶（ALDH）試劑盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào)：YS-01S6330
測(cè)定意義
乙醛脫氫酶 (EC 1.2.1.10)是醛脫氫酶的一種，廣泛存在于各種動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)。主要作用是將乙醛氧化成乙酸，在酒精代謝中起主要作用。在人類和許多動(dòng)物體內(nèi)，線粒體乙醛脫氫酶能把對(duì)生物體有害的醇類轉(zhuǎn)化，所以在細(xì)胞解毒研究中乙醛脫氫酶受到高度關(guān)注；同時(shí)，乙醛脫氫酶在分子生物學(xué)以及相關(guān)疾病的檢測(cè)方面有較廣泛的研究應(yīng)用。
測(cè)定原理
在輔酶Ⅰ存在的條件下，乙醛脫氫酶催化乙醛和NAD+轉(zhuǎn)化為乙酸和NADH，在340nm處的吸光值會(huì)增加，測(cè)定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到乙醛脫氫酶的活性。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、蒸餾水。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-PH-4/FITC 熒光素標(biāo)記脯氨酸水解酶4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Mose Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
胰腺衍生因子抗體 Anti-FAM3B/PANDER 0.1ml
Goat Anti-rabbit IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.3ml
Factor I heavy chain 英文名稱： 補(bǔ)體因子I重鏈抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SYT1(Ser309) 磷酸化突觸結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
Mose Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記小鼠抗大鼠IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml
NRP-2(neuropilin-2) 神經(jīng)纖毛蛋白-2(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-CD44v5 CD44V5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh p53R2/RRM2B 核苷酸還原酶M2B抗體 規(guī)格 0.1ml
IFNAR1 Kit Mouse 小鼠 IFNAR1 ELISA配對(duì)抗體 ELISA
TSPAN9 英文名稱： 四分子交聯(lián)體9/四旋蛋白抗體 0.2ml
C5ORF4 英文名稱： 5號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml
Anti-CD44v5 CD44V5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
SERPINA12 英文名稱： 內(nèi)臟脂肪組織源性絲酸蛋白酶抑制蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Ezrin (Tyr478) 英文名稱： 磷酸化埃茲蛋白抗體 0.1ml
蛋白酶激活受體-1抗體 Anti-PAR-1 0.2ml
Anti-SRC /FITC 熒光素標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-NFKB p65(Thr254) 磷酸化細(xì)胞核因子抗體 規(guī)格 0.1ml
EXPB-2 植物延展素-β(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
乙醛脫氫酶（ALDH）試劑盒規(guī)格伊馬替尼山藥 石蠟切片組織TSH-BETA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
阿利克侖-5山楂（山里紅） TSH-BETA蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
藍(lán)銅肽/甘氨酰-L-組氨酰-L-賴氨酸天冬 TSH-BETA蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
氨苯蝶啶 毛冬青 TSH-BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒
氨苯蝶啶（標(biāo)準(zhǔn)品）巴豆TSH-BETA蛋白共沉淀分析試劑盒
拉呋替丁半邊蓮TSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品）白屈菜 IL蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒
托可索侖/E聚乙二琥珀酸酯白果載玻片IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
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