產(chǎn)品名稱(chēng):高密度脂蛋白(HDL-C)測(cè)試盒品牌
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、可見(jiàn)分光光度法
貨號(hào):YS-01S6489
測(cè)定意義
高密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,運(yùn)載周?chē)M織中的膽固醇,再轉(zhuǎn)化為膽汁酸或直接通過(guò)膽汁從腸道排出,是一種抗動(dòng)脈粥樣硬化的血漿脂蛋白,是冠心病的保護(hù)因子,俗稱(chēng)“血管清道夫",對(duì)冠心病的臨床診斷是一個(gè)重要的參考指標(biāo)。
測(cè)定原理
用沉淀劑分離血清中的高密度脂蛋白膽固醇,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比和酚,生成紅色醌類(lèi)化合物;在500nm有特征吸收峰。
需自備的儀器和用品
離心機(jī),恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋?zhuān)允瓜♂尯蟮臉悠贩显噭┖械臋z測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Fibulin 1 衰老關(guān)鍵蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
癌易感基因1抗體(人) Anti-BRCA1 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Doublecortin (Ser297) 磷酸化雙皮質(zhì)素抗體 規(guī)格 0.1ml
PVDF膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Millipore
ZNHIT1 英文名稱(chēng): 細(xì)胞周期蛋白1結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
DCP1A 英文名稱(chēng): 脫帽酶1A抗體 0.2ml
癌易感基因1抗體(人) Anti-BRCA1 0.1ml
EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體 Anti-BBC3/PUMA 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-EGFR (Ser1190) 磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
DMEM高糖(含酸鈉) 10×1L Gibco
ZNF843 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白843抗體 0.2ml
Dystrobrevin alpha 英文名稱(chēng): 肌營(yíng)養(yǎng)蛋白α抗體 0.2ml
p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體 Anti-BBC3/PUMA 0.1ml
ZDHHC17 英文名稱(chēng): NFκB激活蛋白205抗體 0.1ml
DIS3L2 英文名稱(chēng): 有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體 0.2ml
磷酸化雄受體抗體 Anti-phospho-AR 0.1ml
Anti-CEA/Biotin 生物素化鼠抗人癌胚抗原單克隆抗體(檢測(cè))IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-EIF4G1(Ser1238) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 規(guī)格 0.1ml
EAAT3(Excitatory amino acid transporters 3) 膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸運(yùn)載蛋白3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
高密度脂蛋白(HDL-C)測(cè)試盒品牌氘代(100g )甘草查爾酮通用化學(xué)封閉溶液
氘代苯-D6(0.6ml x 10 )大黃素-8-β-D-吡喃葡萄糖苷化學(xué)封閉溶液
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