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產(chǎn)品名稱:堿性磷酸酶(AKP/ALP)測(cè)試盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/24樣、100管/48樣
測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法
貨號(hào):YS-01S6434
測(cè)定意義
AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。
測(cè)定原理:
在堿性環(huán)境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基安替比和鐵化鉀反應(yīng)紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測(cè)定510 nm吸光度增加速率,來計(jì)算AKP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化孕受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
角質(zhì)形成細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體抗體 Anti-KGFR 0.2ml
Mouse Anti-Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
FOXH1 英文名稱: 叉頭蛋白H1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Stathmin(Ser25) 磷酸化原癌基因蛋白18 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-dog IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗狗IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
JAK1(Tyrosine-protein kinase JAK1; Janus kinase 1) 蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原癌蛋白CBL2抗體 規(guī)格 0.1ml
單組分AEC染色試劑盒 200片/20ml 需用甘油封固,紅色
VAPB 英文名稱: 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B 0.2ml
DNA polymerase mu 英文名稱: DNA聚合酶μ/DNA pol μ抗體 0.2ml
Anti-phospho-ADRB2(Ser346) 磷酸化腎上腺素能受體β2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SorLA/LRP9 英文名稱: 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白9抗體 0.2ml
ER81 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 0.2ml
壞死因子受體相關(guān)因子1抗體 Anti-TRAF1 0.2ml
Anti-TRADD/FITC 熒光素標(biāo)記有死亡區(qū)的壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB3(Tyr785) 磷酸化整合素β3抗體 規(guī)格 0.1ml
PS-1,Presennillin-1(CT) 早老素蛋白-1(S182)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
堿性磷酸酶(AKP/ALP)測(cè)試盒規(guī)格1-溴3-氯烷(>97%,BR)木犀草素3′端DNA生物素轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒
溴代庚烷(>98%,BR)木犀草苷生物素核酸蛋白結(jié)合反應(yīng)試劑盒
1-溴代萘(>98%,BR)沒食子酸生物素化學(xué)底物復(fù)合試劑盒
溴辛烷(>98%,BR)蒙花苷通用型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒
1-甲基咪唑(>98%,BR)莽草酸可溶性總核蛋白制備試劑盒
1-乙基咪唑(>98%,BR)芹菜素組織可溶性總核蛋白制備試劑盒
1-萘乙(>98%,BR)青藤堿可溶性總蛋白制備試劑盒
乙酸-1-萘酯(>98%,BR)齊墩果酸組織可溶性總蛋白制備試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。