詳細(xì)介紹
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:肺癌細(xì)胞;SPC-A-1
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào):YS-02X9727
細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。
STAT4 /FITC 熒光素標(biāo)記信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
蛋白激酶A抗體 PKA 0.1ml
Salmonella enteritidis H 英文名稱: 傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體 0.2ml
ETS1 英文名稱: Ets轉(zhuǎn)錄因子家族e(cuò)ts1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌決定因子Myf5抗體 規(guī)格 0.1ml
GFRA4 ( Persephin receptor ) (GFR receptor alpha 4) GDNF家族受體α-4(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
cAMP Human 人環(huán)磷酸腺苷Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
CLEC13D/CD206 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NPTX2 神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體 規(guī)格 0.2ml
TUNEL 細(xì)胞凋亡原位檢測(cè)試劑盒(我公司提供代測(cè)服務(wù)) 10人份
TMPRSS4 英文名稱: 膜型絲酸蛋白酶2抗體 0.2ml
C6orf72 英文名稱: 6號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 0.2ml
CLEC13D/CD206 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Chicken IgG whole serum 羊抗雞IgG抗血清 1ml
Fibrinogen gamma chain 英文名稱: 纖維蛋白原γ鏈抗體 0.2ml
支架蛋白抗體 IQGAP1 1mg
Patched/PTCH /FITC 熒光素標(biāo)記Hh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑膜蛋白受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PRKCB(Ser660) 磷酸化蛋白激酶C抗體 規(guī)格 0.1ml
AGEs control article(advanced glycosylation end products control article) 晚期糖基化終末產(chǎn)物蛋白對(duì)照品Multi-class antibodies規(guī)格: 50mg
肺癌細(xì)胞;SPC-A-1異丁司特(標(biāo)準(zhǔn)品)水飛薊寧血液瓜含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
吉西他濱水飛薊亭培養(yǎng)液瓜含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
沙利度(反應(yīng)停)水楊苷水果瓜含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
沙利度(標(biāo)準(zhǔn)品)斯皮諾素食品添加劑瓜含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素松蘿酸 豆制品U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒
頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)穗花牡荊甙果菜U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒
文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品)穗花杉雙黃酮嬰兒配方食品U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒
茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品)他克莫司FK-506茶葉U(S-Methylmethionine)比色法定量檢測(cè)試劑盒