產(chǎn)品名稱:羥脯氨酸(HYP)測(cè)試盒品牌
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法
貨號(hào):YS-01S6421
測(cè)定意義
HYP是機(jī)體膠原蛋白主要成分之一,膠原蛋白大多分布于皮膚、腱、軟骨和血管等,因此HYP含量是反映膠原組織代謝及纖維化程度的一項(xiàng)重要指標(biāo)。
測(cè)定原理
樣品經(jīng)酸水解產(chǎn)生游離的HYP,進(jìn)一步被氯胺T氧化,氧化產(chǎn)物與對(duì)二甲氨基苯甲反應(yīng),產(chǎn)生紅色化合物,在560nm處有特征吸收峰。通過測(cè)定樣品水解液560nm吸光
值,可計(jì)算HYP含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、烘箱、玻璃管、離心機(jī)、水浴鍋、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、6mol/L鹽酸和蒸餾水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Anti-PRDX3/FITC 熒光素標(biāo)記過氧化還原酶3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
擬南芥IKI3抗體 Anti-IKI3 family protein 0.2ml
Donkey anti-Gpig IgG whole serum 驢抗豚鼠IgG抗血清 1ml
FAKD3 英文名稱: 下頜發(fā)育綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PTPN7(Ser93) 磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG Whole serum 兔抗馬IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 磷酸化細(xì)胞核因子/磷酸化k基因結(jié)合核因子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATXN1(Thr236) 磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
山羊抗兔 IgG(H+L)/Biotin 0.1ml 美國(guó)公司分裝
VEGF-A 英文名稱: 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A 0.1ml
DNA polymerase delta 英文名稱: DNA聚合酶γ抗體 0.2ml
Anti-APOD 載脂蛋白D抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SUZ12 英文名稱: 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體 0.2ml
Estrogen Related Receptor gamma 英文名稱: 雌受體相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml
胸腺素β10抗體 Anti-Tβ10 0.1ml
Anti-Trop-2/gp50/Tpm2 /FITC 熒光素標(biāo)記原肌球蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-INPPL1(Ser576) 肌醇聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml
TGF-Alpha (Ttansforming Growth Factor –Alpha) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–α(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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汽巴藍(lán)黃豆黃苷 組蛋白H4-K16乙?;瘷z測(cè)試劑盒
DEAE葡聚糖黃豆黃素 組蛋白H2B-K46甲基化(di)檢測(cè)試劑盒
氟啶酮(>98%,植物級(jí))大豆苷 組蛋白H3-K4(mono/di/tri)甲基化檢測(cè)試劑盒
組(>98%,BC)大豆苷元 組蛋白H3-K9(mono/di/tri)甲基化檢測(cè)試劑盒
海染料木素 組蛋白H3-K18(mono)甲基化檢測(cè)試劑盒