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磷脂酶B(PLB)重組蛋白

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更新時間:2023-03-21 20:34:28瀏覽次數(shù):288

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Phospholipase B (PLB)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
磷脂酶B(PLB)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:α1-抗胰(a1AT)重組蛋白英文名稱:Recombina Alpha-1-Aitrypsin (a1AT)α1-抗胰(a1AT)重組蛋白英文名稱:Recombina Alpha-1-Aitrypsin (a1AT)乳suan脫氫meiB(LDHB)重組蛋白英文名稱:Recombina Lactate Dehydrogenase B (LDHB)

詳細(xì)介紹

商品介紹:

PLB; PL-B1; PLB1; PLB/LIP; Phospholipase B1, membrane-associated; Phospholipase B/lipase; Lysophospholipase; Phospholipase A2

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

代謝通路

營養(yǎng)代謝

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜

預(yù)測分子量:51.0kDa

實(shí)際分子量:51kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Met1036~Leu1458 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):5.9

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

磷脂酶B(PLB)重組蛋白

Recombinant Phospholipase B (PLB)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human CA12宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human TFAP2B宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human SPA17宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Mouse C5宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Mouse   
操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

ZNF182產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白182抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

TGF beta 2產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

PD-1產(chǎn)品名稱: 程序性死亡1(CD279)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit

FoxP3產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白P3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

Phospho-NFKB p65 (Ser468)產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞核因子NF-κB p65抗體產(chǎn)品別名: NFκB-p65; NFκB p65; NF κB-p65; NFκBp65;

Histone H3 (tri methyl K79)產(chǎn)品名稱: 甲基化組蛋白H3(Tri methyl K79)單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

DATF1產(chǎn)品名稱: 死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Sheep

Caspase-1 P10產(chǎn)品名稱: 天冬氨suan-胱氨suan特異性蛋白mei家族抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

phospho-MCSF Receptor (Tyr723)產(chǎn)品名稱: 巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

phospho-CDK7 (Thr170)產(chǎn)品名稱: 周期su依賴性激mei7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit   

磷脂酶B(PLB)重組蛋白人胞漿免疫球蛋白(CIg)ELISA試劑盒CIg胞漿免疫球蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human cytoplasmic immunoglobulin,CIg ELISA Kit

人伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒CPN10伴侶蛋白10elisa檢測試劑盒Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit

人半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒Galactose半乳糖elisa kitHuman Galactose ELISA Kit

人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒CysLTs半胱氨酰白三烯ELISA試劑盒Human cysteinyl leukotrienes,CysLTs ELISA Kit

人板層su相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒TMPO板層su相關(guān)多肽2亞型αelisamei聯(lián)免疫試劑盒Human TMPO ELISA Kit  
注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

 


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