產(chǎn)品名稱:肺癌細(xì)胞;Calu-1
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9562
細(xì)胞生長實驗 :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
A/H1N1-M2 Human /Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人A型人流感病毒H1N1-M2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD90抗體 Thy-1/CD90 0.1ml
SPDYA 英文名稱: 細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體 0.2ml
ECE2 英文名稱: 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Kv2.1(Tyr128) 磷酸化鉀通道蛋白DRK1抗體 規(guī)格 0.1ml
PACAP-27/38 腺苷酸環(huán)化酶激活肽-27/38(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PCX/PODXL(Podocalyxin) 足細(xì)胞特異蛋白抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
ATP4B 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ANAPC1(Ser377) 磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體 規(guī)格 0.1ml
P53 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UBXD2 英文名稱: UBX結(jié)構(gòu)域域蛋白D2抗體 0.2ml
DRIP5 英文名稱: 多巴胺受體相互作用蛋白5抗體 0.2ml
ATP4B 氫鉀ATP酶通道蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SA2 英文名稱: 粘結(jié)蛋白SA2抗體 0.2ml
EMR2 英文名稱: CD312抗體 0.1ml
鉀依賴鈉鈣交換蛋白6 SLC6A19 0.2ml
Tetracycline/FITC 熒光素標(biāo)記四環(huán)素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MBP(Thr232) 磷酸化髓鞘堿性蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
MTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
肺癌細(xì)胞;Calu-12,4-二氯苯酚(>98.0%(GC))沒藥(天然沒藥)組織丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
2,4-二氯酚(>98.0%(GC))陳皮血液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
1,2-二溴-3-氯烷(1mg/mL的甲溶液)乳香體液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測試劑盒
鄰苯二甲酸丁芐酯(>97.0%(GC))南板藍(lán)根磷脂酶A2(Phospholipase A2)活性比色法定量檢測試劑盒
鄰苯二甲酸二戊酯(>98.0%(GC))浙貝母組織磷脂酶A2(Phospholipase A2)活性比色法定量檢測試劑盒
鄰苯二甲酸二丁酯(>97.0%(GC))莪術(shù)(蓬莪術(shù))磷脂酶A2(Phospholipase A2)活性熒光定量檢測試劑盒
鄰苯二甲酸二環(huán)己酯(>99.0%(GC))黃芪(蒙古黃芪)組織磷脂酶A2(Phospholipase A2)活性熒光定量檢測試劑盒
鄰苯二甲酸二乙酯(>98.0%(GC))黑豆磷脂酶B(Phospholipase B)活性比色法定量檢測試劑盒
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強(qiáng),殺菌效果好。