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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1 ( |
| 物種 | Mus musculus (Mouse，小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1(APEX1)重組蛋白
物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)
英文名稱：Recombinant Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1 (APEX1)
APE; APE1; APEN; APEX; APX; HAP1; REF1; Multifunctional DNA Repair Enzyme; APEX Nuclease 1; Redox factor-1; DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase
酶與激酶
物種：Mus musculus (Mouse，小鼠) 來源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位：：n/a 預(yù)測(cè)分子量：- 實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書) 片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag 緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） 性狀：凍干粉 純度：> 97% 等電點(diǎn)：- 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品：
CD38分子(CD38)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
cGMP依賴性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type I (PRKG1)Homo sapiens (Human，人)
cGMP依賴性蛋白激酶Ⅱ(PRKG2)活性蛋白英文名稱：Active Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2)Homo sapiens (Human，人)
cGMP依賴性蛋白激酶Ⅱ(PRKG2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2)Homo sapiens (Human，人)
標(biāo)簽選擇：
親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試，條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶，蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。
操作步驟 ：
根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。
1、樣品前處理：
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點(diǎn)：
標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見、敏感性高。
熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
DAK產(chǎn)品名稱: 二羥基激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
ZNF318產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白318抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
C19orf24產(chǎn)品名稱: 19號(hào)染色體開放閱讀框24抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
phospho-c-Abl (Thr735)產(chǎn)品名稱: 非受體酪氨suan激meic-Abl抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig
PCDHB3產(chǎn)品名稱: 原鈣粘蛋白β3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
FGD1產(chǎn)品名稱: FGD1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
SALL2產(chǎn)品名稱: 鋅指轉(zhuǎn)錄蛋白SALL2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
HOXC12產(chǎn)品名稱: 同源盒蛋白C12抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Zebrafish, Sheep
UGDH產(chǎn)品名稱: 尿苷二磷suan葡萄糖脫氫mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
PRRT3產(chǎn)品名稱: 富含脯氨suan跨膜蛋白3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
脫嘌呤/脫嘧啶核酸內(nèi)切酶1(APEX1)重組蛋白人激肽釋放mei8(KLK8)ELISA試劑盒KLK8激肽釋放mei8elisa檢測(cè)試劑盒Human Kallikrein 8(KLK8)ELISA Kit
人激肽釋放mei2(KLK2)ELISA試劑盒KLK2激肽釋放mei2elisa kitHuman Kallikrein 2(KLK2)ELISA Kit
人激肽釋放mei15(KLK15)ELISA試劑盒KLK15激肽釋放mei15ELISA試劑盒Human Kallikrein 15(KLK15)ELISA Kit
人激肽釋放mei14(KLK14)ELISA試劑盒KLK14激肽釋放mei14elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Kallikrein 14(KLK14)ELISA Kit
人激肽釋放mei13(KLK13)ELISA試劑盒KLK13激肽釋放mei13elisa檢測(cè)試劑盒Human Kallikrein 13(KLK13)ELISA Kit
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