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天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-21 21:07:02瀏覽次數(shù):1016

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Legumain (LGMN)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:氨酰tRNA合成mei復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombina Aminoacyl tRNA Syhetase Complex Ieracting Multifunctional Protein 1 (AIMP1)氨酰tRNA合成mei復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombina Amin

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

物種

天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白

Recombinant Legumain (LGMN)

Homo sapiens (Human,人)

商品介紹:

AEP; LGMN1; PRSC1; Protease,Cysteine 1; Asparaginyl endopeptidase

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::溶酶體

預(yù)測(cè)分子量:51.4kDa

實(shí)際分子量:51kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Val18~Tyr433 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):6.0

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

Recombinant Human CHD2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human GRK2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant Human PTMA宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

Recombinant chicken Calprotectin宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Chicken   

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

DC-SIGNR1/CD209b產(chǎn)品名稱(chēng): CD209b抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat

GLUT2產(chǎn)品名稱(chēng): 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse

Aquaporin 5產(chǎn)品名稱(chēng): 水通道蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

Neurokinin 1 Receptor產(chǎn)品名稱(chēng): P物質(zhì)受體抗體產(chǎn)品別名: NK1-R

應(yīng)用類(lèi)型: Other英文名稱(chēng): NMDAR1英文別名: NMDA-NR1; N-Methyl-d-Asprtate receptor 1; GRIN1; NMDA1; NR1; Glutamate [NMDA] receptor subunit zeta 1; Glutamate receptor iotropic N methyl D aspartate 1; Grin 1; Grin1; N methyl D aspartate receptor channel; N-methyl-D-aspartate receptor; N-methyl-D-aspartate receptor subunit NR1; NMD-R1; NMDA 1; NMDA NR1; NMDA R1; NMDA receptor 1; NMDA1; NMDAR 1; NMDAR; NR 1; NMDZ1_HUMAN.

應(yīng)用類(lèi)型: Other英文名稱(chēng): Keratin 4英文別名: CK 4; CK4; CYK 4; CK-4; CYK4; Cytokeratin4; Cytokeratin-4; FLJ31692; K4; Keratin 4; Keratin-4; Keratin type II cytoskeletal 4; Keratin4; KRT 4; KRT4; K2C4_HUMAN; Keratin, type II cytoskeletal 4; K4; Type-II keratin Kb4.

Ephrin A5產(chǎn)品名稱(chēng): 酪氨suan蛋白激meiA5受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

Bad產(chǎn)品名稱(chēng): 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

TNFAIP1產(chǎn)品名稱(chēng): 腫壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

PMM1產(chǎn)品名稱(chēng): 磷suan甘露糖變位mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

天冬酰胺內(nèi)肽酶(LGMN)重組蛋白GTPmeiNRas(NRAS)ELISA試劑盒NRASGTPmeiNRaselisa檢測(cè)試劑盒Human NRAS ELISA kit

Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒GREM1Gremlin-1蛋白elisa kitHuman GREM1 ELISA kit

GDP解離2(GdI2)ELISA試劑盒GdI2GDP解離2ELISA試劑盒Human GdI2 ELISA kit

G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1(CCNE1)ELISA試劑盒CCNE1G1/S特異性細(xì)胞周期蛋白E1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human CCNE1 ELISA kit

F-肌動(dòng)蛋白(F-actin)ELISA試劑盒F-actinF-肌動(dòng)蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human F-actin ELISA Kit 


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