產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase B Beta (PKBb) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-21 19:59:02瀏覽次數(shù):319
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase B Beta (PKBb) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
蛋白激酶Bβ(PKBb)重組蛋白 | Recombinant Protein Kinase B Beta (PKBb) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
AKT2; PKBBETA; PRKB-B; RAC-BETA; RAC-Beta Serine/Threonine-Protein Kinase; V-Akt Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 2 酶與激酶 代謝通路 內(nèi)分泌學(xué) 激素代謝 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì) 預(yù)測分子量:34.9kDa 實際分子量:38kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Lys142~Ile412 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點:7.8 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human HBXIP宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CD246宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human Band 3宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human CIP4宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
ICBP90/UHRF1產(chǎn)品名稱: 核蛋白95抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, GuineaPig
LDL receptor產(chǎn)品名稱: 受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig
IL-12 beta產(chǎn)品名稱: 白細(xì)胞介su12 β亞基蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Sheep
Bax產(chǎn)品名稱: Bax抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
OTUD1產(chǎn)品名稱: OTUD1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
CCDC39產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白39抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Rabbit
CHST10產(chǎn)品名稱: 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移mei10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
FOXA2產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞核因子3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse
ZO-1產(chǎn)品名稱: 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體交叉反應(yīng):
蛋白激酶Bβ(PKBb)重組蛋白人桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)ELISA試劑盒BIRC2/3桿狀病毒IAP重復(fù)包含蛋白2/3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human BIRC2/3 ELISA Kit
人肝su-血小板因子4復(fù)合物抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG肝su-血小板因子4復(fù)合物抗體elisa kitHuman Heparin-Platelet factor4 Complex antibody IgG ELISA Kit
人肝su輔因子II-mei(HCII-T)復(fù)合物ELISA試劑盒HCII-T肝su輔因子II-meiELISA試劑盒Human heparin cofactor II-thrombin(HCII-T)complex ELISA kit
人甘油二酯(DAG)ELISA試劑盒DAG甘油二酯elisa檢測試劑盒Human diacylglycerol,DAG ELISA kit
人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒MR甘露糖受體elisa kitHuman mannose receptor,MR ELISA Kit