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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enz |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細(xì)介紹
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱：泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白
物種：Homo sapiens (Human，人)
英文名稱：Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 6 (UBA6)
UBE1L2; MOP-4; Monocyte protein 4; Ubiquitin-Activating Enzyme E1-Like 2; Ubiquitin-activating enzyme E1-like protein 2
酶與激酶
物種：Homo sapiens (Human，人) 來(lái)源：原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位：：分泌 預(yù)測(cè)分子量：23.6kDa 實(shí)際分子量：24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽：Met1~Ile181 with N-terminal His Tag 緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點(diǎn)：5.5 應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
特點(diǎn)：
標(biāo)記：標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性，將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記：酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成，其應(yīng)用范圍非常廣泛，結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。
熒光標(biāo)記：熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一，產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光， 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況，主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色，是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
相關(guān)產(chǎn)品：
中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)Homo sapiens (Human，人)
中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)Homo sapiens (Human，人)
周期素依賴性激酶1(CDK1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 1 (CDK1)Homo sapiens (Human，人)
周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)Homo sapiens (Human，人)
標(biāo)簽選擇：
親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長(zhǎng)肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試，條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶，蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定，包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白；表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后，表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng)，按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
Phospho-FoxO3a (Ser253)產(chǎn)品名稱: 叉頭蛋白3A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
Di-Methyl-Histone H3 (Lys4)交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Rabbit
BCMA產(chǎn)品名稱: B淋巴細(xì)胞成熟因子（CD269）抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat
GLIPR1L1產(chǎn)品名稱: 膠質(zhì)發(fā)相關(guān)蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human
Regucalcin產(chǎn)品名稱: 衰老標(biāo)記蛋白30抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
GRB10產(chǎn)品名稱: 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
TNRC18產(chǎn)品名稱: TNRC18蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
phospho-Kidins220 (Ser918)產(chǎn)品名稱: 220kDa蛋白激meiD相互作用蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, GuineaPig
LHFP產(chǎn)品名稱: LHFP蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
CCDC67產(chǎn)品名稱: 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Sheep
泛素樣修飾激活酶6(UBA6)重組蛋白人Marapsin人2蛋白(MPN2)ELISA試劑盒MPN2Marapsin2蛋白elisa檢測(cè)試劑盒Human Marapsin 2(MPN2)ELISA Kit
人Marapsin蛋白(MPN)ELISA試劑盒MPNMarapsin蛋白elisa kitHuman Marapsin(MPN)ELISA Kit
人Malectin蛋白(MLEC)ELISA試劑盒MLECMalectin蛋白ELISA試劑盒Human Malectin(MLEC)ELISA Kit
人Maestro蛋白(MRO)ELISA試劑盒MROMaestro蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Maestro(MRO)ELISA Kit
人L-天冬氨suan脫氫mei(ASPDH)ELISA試劑盒ASPDHL-天冬氨suan脫氫meielisa檢測(cè)試劑盒Human L-Aspartate Dehydrogenase(ASPDH)ELISA Kit
操作步驟 ：
根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）。
1、樣品前處理：
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管，然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品： 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
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