1.簡介

乳糖是一種白色結(jié)晶雙糖，它存在于哺乳動(dòng)物所分泌的乳中。在乳糖酶（β-半乳糖苷酶）催化下，乳糖水解產(chǎn)生D-半乳糖和D-葡萄糖。缺乏此酶的成年人不能消化牛奶中的乳糖，攝入含乳糖食品30分鐘至兩個(gè)小時(shí)后會(huì)出現(xiàn)嘔吐、腹部絞痛、排氣和腹瀉等癥狀，稱為乳糖不耐癥。美國人中有3千萬到5千萬人患有乳糖不耐癥，并且某些人種和種族更為嚴(yán)重。高達(dá)75%的非裔美國人和土著美國人及90%亞裔美國人都患有乳糖不耐癥，而北歐血統(tǒng)的人則很少出現(xiàn)這一癥狀。

酶法分析測定乳糖的主要原理為β-半乳糖苷酶催化乳糖水解產(chǎn)生D-半乳糖和D-葡萄糖，通過檢測D-半乳糖和D-葡萄糖的含量計(jì)算乳糖含量。檢測D-半乳糖含量比檢測D-葡萄糖含量更可靠，因?yàn)橛坞xD-葡萄糖含量通常高于游離D-半乳糖含量。

目前市場上的D-半乳糖檢測試劑盒檢測速度非常慢。因?yàn)?span>D-半乳糖包括α-和β-兩種形式，并且自然化學(xué)變旋的概率很低，而β-半乳糖脫氫酶往往只識(shí)別β-形式。開始孵育時(shí)，由于β-D-半乳糖快速被消耗，因此吸光度值迅速增加，隨后由于α-D-半乳糖轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>β-D-半乳糖的速率非常低，因此吸光度值慢慢增加達(dá)到終點(diǎn)。Megazyme乳糖和半乳糖檢測試劑盒采用技術(shù)，在試劑盒中加入半乳糖變旋酶，可快速催化限速變旋步驟，室溫下5分鐘即可獲得檢測結(jié)果（見圖1）。