目錄:和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司>>蛋白與免疫>>顯色成像>> AP34L034/AP34L035EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級(jí))
參考價(jià) | ¥698-¥2698 |
參考價(jià):¥698 ~ ¥2698
100mL 500mL
供貨周期:現(xiàn)貨 規(guī)格:100mL 貨號(hào):AP34L034/AP34L035 應(yīng)用領(lǐng)域:環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合
>100mL | 698元 | 99件 可售 |
500mL | 2698元 | 99件 可售 |
更新時(shí)間:2024-08-06 19:49:20瀏覽次數(shù):1951評(píng)價(jià)
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100mL |
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貨號(hào) | AP34L034/AP34L035 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品名稱 | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液(飛克級(jí)) | AP34L034 | 100 mL |
EZ ECL Femto化學(xué)發(fā)光液( 飛克級(jí) ) | AP34L035 | 500 mL |
組分名稱 | A液 | B液 |
AP34L024(100 mL) | 50 mL | 50 mL |
AP34L025(500 mL) | 250 mL | 250 mL |
取出印記膜,加入合適的封閉液在溫室下孵育20~60 min,同時(shí)振蕩,以封閉膜上非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)。
將膜從封閉液中取出,與一抗工作液在溫室孵育1 h,同時(shí)振蕩;或在28℃孵育過(guò)夜,不振蕩。
將足量的洗滌緩沖液加至膜上,保證緩沖液將膜*覆蓋。振蕩孵育≥5 min,更換洗滌緩沖液并重復(fù)該步驟4~6次。增加洗滌緩沖液體積,洗滌次數(shù)和洗滌時(shí)間有助于降低背景信號(hào)。【注】:①孵育前,膜在洗滌緩沖液中的短暫淋洗會(huì)提高洗滌效率。②按前文建議的HRP標(biāo)記二抗稀釋度非常重要的。
將HRP標(biāo)記的二抗工作液與膜在溫室孵育1 h,同時(shí)振蕩。
重復(fù)步驟3,以除去未結(jié)合的HRP標(biāo)記二抗。【注】:膜與HRP標(biāo)記二抗孵育后必須進(jìn)行*洗滌。
將A溶液與B液等比例混合,制備成工作液。每cm2膜使用0.01~0.1 mL工作液,工作液可以在溫室下穩(wěn)定8 h。
【注】:暴露于日光或其他強(qiáng)光下可能損害工作液,為獲得最佳結(jié)果,請(qǐng)將此工作液保存在琥珀色瓶中光;實(shí)驗(yàn)室的常見(jiàn)照明不會(huì)損害工作液。
將印記膜在工作液中孵育5 min。從工作液中取出印記膜,并置于一個(gè)塑料片或清潔的塑料紙(膜)中,用一張吸水紙吸除多余的液體,并從印記和塑料紙之間小心地壓出氣泡。
將包在塑料紙(膜)中的印記膜置于膠片暗盒中,蛋白質(zhì)面朝上,除適用于膠片曝光的燈(如紅色安全燈)之外,關(guān)閉所有的燈。
【注】:①膠片必須在曝光期間保持干燥;②確保將多余的底物從膜和塑料紙上*去除;③在整個(gè)膠片處理期間,使用手套。
將X光膠片置于膜的上面。建議第一次曝光60 s。之后可調(diào)整曝光時(shí)間以達(dá)到最佳結(jié)果。化學(xué)發(fā)光反應(yīng)在底物孵育后的前5~30 min期間是強(qiáng)烈的。這一反應(yīng)可以持續(xù)幾個(gè)小時(shí),但強(qiáng)度會(huì)隨時(shí)間下降,如有底物孵育后較長(zhǎng)時(shí)間后曝光,曝光時(shí)間可能需要延長(zhǎng)以獲得較強(qiáng)信號(hào)。如果使用磷光存儲(chǔ)成像設(shè)備(如Bio-Rad的分子成像儀系統(tǒng))或CCD照相機(jī)可能需要較長(zhǎng)的曝光時(shí)間。
【注】:膠片與膜之間的任何移動(dòng)可能在膠片上造成人為的非特異信號(hào)。
使用合適的顯影劑和定影劑對(duì)膠片進(jìn)行顯影。如果信號(hào)太強(qiáng),則縮短曝光時(shí)間或?qū)⒂∮浤みM(jìn)行剝離并降低抗體濃度重新檢測(cè)。
本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
為獲得最佳效果,必須優(yōu)化該系統(tǒng)的全部組分,包括樣品量、一抗和二抗?jié)舛纫约澳ず头忾]試劑的類型。
使用本產(chǎn)品比使用沉淀比色HRP底物檢測(cè)所需的抗體濃度低。為優(yōu)化抗體濃度,請(qǐng)進(jìn)行一次系統(tǒng)的點(diǎn)印跡分析。
沒(méi)有一種封閉試劑對(duì)所有系統(tǒng)而言都是最佳的,所以為每一個(gè)免疫印跡檢測(cè)系統(tǒng)找到最合適的封閉緩沖液非常必需。封閉試劑有可能與抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng),導(dǎo)致出現(xiàn)非特異性信號(hào)。封閉緩沖液同時(shí)也會(huì)影響系統(tǒng)的靈敏性。當(dāng)從一種底物轉(zhuǎn)換為另一種底物時(shí),有時(shí)會(huì)出現(xiàn)信號(hào)衰減或背景增加的現(xiàn)象,原因可能是封閉緩沖液不適合新的檢測(cè)系統(tǒng)。
使用親和素/生*素檢測(cè)系統(tǒng)時(shí),避免使用牛奶作為封閉試劑,因?yàn)榕D讨泻胁欢康膬?nèi)源性生*素,會(huì)導(dǎo)致高背景信號(hào)。
保證洗滌緩沖液、封閉緩沖液、抗體溶液和底物工作液的使用體積,以確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中印跡膜*被液體覆蓋,避免膜變干。增大封閉緩沖液及洗滌緩沖液的使用量可以降低非特異性的信號(hào)。
為獲得最佳效果,在孵育步驟請(qǐng)使用搖床。
將Tween20(終濃度0.05~0.1%)加入封閉緩沖液和稀釋的抗體溶液,以降低非特異信號(hào)。使用高品質(zhì)的產(chǎn)品,如去污劑。它保存在安瓿中,過(guò)氧化物和其他雜質(zhì)含量很低。
不要使用疊氮鈉作為緩沖液的防腐劑。疊氮鈉是HRP的抑制。
避免手與膜直接接觸,實(shí)驗(yàn)過(guò)程應(yīng)戴手套或使用干凈的鑷子。
所有設(shè)備必須清潔且不沾染外來(lái)物質(zhì)。金屬器械(如剪刀)不得具有可見(jiàn)的銹跡。銹跡可能導(dǎo)致斑點(diǎn)形成和高背景。
底物工作液在室溫下可穩(wěn)定8 h。日光或任何其他強(qiáng)光下可能損害底物,為獲得最佳結(jié)果,將底物工作液保存在琥珀色瓶中,并避免長(zhǎng)期暴漏在任何強(qiáng)光下,短時(shí)間暴漏于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)照明不會(huì)損害該工作液。
EZ Trans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑(高效)(貨號(hào):AC04L092)
EZ250 DNA Ladder(250-12000bp)(貨號(hào):AN33L096)
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