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L-02人正常肝細胞特點及傳代說明

2016-7-1  閱讀(3149)

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     L-02人正常肝細胞特點:
    1. 特異性強:只對腫瘤細胞進行有效識別和殺滅,而不傷害正常組織和細胞,抗瘤譜廣。
    2. 對體內各種腫瘤細胞均能有效治療。
    3.安全性好,除可能出現(xiàn)的發(fā)熱、少量出血外,無其他不良反應
    4.本產(chǎn)品具有良好的增殖和分化潛能,可分化為骨細胞,脂肪細胞,軟骨細胞等,流式檢測結果顯示,CD29,CD44,CD105陽性,CD35,CD45陽性
    L-02人正常肝細胞增殖及傳代說明:
    (一)如果細胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
    (二)如果細胞已長滿,即可進行傳代培養(yǎng),具體步驟如下:
    1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
    2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱,之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
    3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
    細胞經(jīng)過嚴格的控制(從組織來源、實驗室條件等方面),人正常肝細胞;L-02純度可達98%。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取,于原代(或二代)凍存在液氮中。細胞采用干冰運輸,客戶收到細胞后,從干冰中取出放入液氮中保存,待實驗安排好后,解凍后即可以進行復蘇培養(yǎng)。公司實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴格檢驗,分離、配制而成,產(chǎn)品質量過硬。
    運輸與保存:本品使用10%DMSO凍存液冷凍,采用干冰保存運輸,收到細胞后,如果不立即復蘇,請將細胞放入液L-02人正常肝細胞;L-02復蘇方法:取出凍存管后,投入37 ℃水浴中,震蕩解凍2 min,酒精消毒管壁外側后,將其轉入超凈臺中,將管內細胞轉移至離心管中,加入5 ml 37 ℃預熱的培養(yǎng)基,并清洗凍存管一次,將離心管離心(1000 rpm,5 min),棄去上清液,再加入2 ml培養(yǎng)基,轉入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
    注意事項:(1) 本產(chǎn)品只供科研使用,不可應用于臨床;(2) 嚴格無菌操作。

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