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懂了這些ELISA技能點你就入門了
ELISA試劑盒為了得到非常好的實驗效果,一些實驗菜鳥們還需多加了解技術(shù)內(nèi)容,公司每周都會為您精心收拾出關(guān)鍵技術(shù)辦法,可以熟練的掌握好這些往后再應(yīng)用到實驗里邊就會簡略的多。今日的主要內(nèi)容ELISA試劑盒的一些技術(shù)關(guān)鍵:
樣本加樣辦法
1、細(xì)胞上清:前處理有必要是細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
2、腦脊液:前處理有必要是細(xì)胞離心去掉,每孔直接加100μl即可。假定濃度太高需稀釋時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
3、血清血漿:請參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液賠償至100ul。
4、組織勻漿液的樣本,要制備過程中需要在緩沖液中參與蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酶降解,構(gòu)成查看效果的值偏低。
ELISA試劑盒因組織勻漿液的樣本蛋白品種多,含量豐厚,實驗參照血清血漿標(biāo)本的處理辦法進(jìn)行,否則就會影響實驗效果。具體是參與50ul樣本分析緩沖液后加50ul標(biāo)本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩沖液等量參與,缺少部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液賠償至100ul。
A.血清標(biāo)本應(yīng)是天然凝聚后,取上清,防止在冰箱中凝聚血液;
B.血漿標(biāo)本,推薦用EDTA的辦法收集若待測樣本不能及時查看,標(biāo)本收集后請分裝,凍存于-20℃,防止重復(fù)凍融。
C.血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑;
D.標(biāo)本應(yīng)明澈通明,查看前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去掉。
E.請勿運用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本查看,否則效果將不。
ELISA試劑盒因為政策蛋白不一樣,或許構(gòu)成降解的蛋白類型或許不一樣,假定實驗前通過文獻(xiàn)斷定用哪種蛋白酶抑制劑,有針對性參與,可節(jié)省抑制劑。假定查不到有關(guān)文獻(xiàn),可采用組合抑制的辦法確保蛋白不易被降解。
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