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LC3000U型高效液相色譜儀是一款基于嵌入式操作系統(tǒng),全新設(shè)計(jì)的新一代色譜儀系統(tǒng)。
本系統(tǒng)主要由P3000U.UV3000U(或UV3000UD)組成,外觀美觀大方,操作便利,運(yùn)行可靠,是常規(guī)分析實(shí)驗(yàn)室常用的分析儀器。本系統(tǒng)可廣泛的用于醫(yī)藥、制藥、食品、衛(wèi)生防疫、環(huán)保等多個(gè)領(lǐng)域。下面講講使用過程可能會(huì)遇到的癥狀及處理方法:
癥狀:
(一)保留時(shí)間變化
可能的原因:解決方法
1.柱溫變化:柱恒溫;
2.等度與梯度間未能充分平衡:至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱;
3.緩沖液容量不夠:用>25mmol/L的緩沖液;
4.柱污染:每天沖洗柱;
5.柱內(nèi)條件變化:穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動(dòng)相;
6.柱快達(dá)到壽命:采用保護(hù)柱;
(二)保留時(shí)間縮短
可能的原因:解決方法
1.流速增加:檢查泵,重新設(shè)定流速;
2.樣品超載:降低樣品量;
3.鍵合相流失:流動(dòng)相PH值保持在3-7.5檢查柱的方向;
4.流動(dòng)相組成變化:防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀;
5.溫度增加:柱恒溫;
(三)保留時(shí)間延長(zhǎng)
可能的原因:解決方法
1.流速下降:管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡;
2.硅膠柱上活性點(diǎn)變化:用流動(dòng)相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱;
3.鍵合相流失:同前(二)3;
4.流動(dòng)相組成變化:同前(二)4;
5.溫度降低:同前(二)5;
(四)出現(xiàn)肩峰或分叉
可能的原因:解決方法
1.樣品體積過大:用流動(dòng)相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%;
2.樣品溶劑過強(qiáng):采用較弱的樣品溶劑;
3.柱塌陷或形成短路通道:更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件;
4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效:更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品;
5.進(jìn)樣器損壞:更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子;
(五)鬼峰
可能的原因:解決方法
1.進(jìn)樣閥殘余峰:每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗;
2.樣品中未知物:處理樣品;
3.柱未平衡:重新平衡柱,用流動(dòng)相作樣品溶劑(尤其是離子對(duì)色譜);
4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜):每天新配,用抗氧化劑;
5.水污染(反相):通過變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量,用HPLC級(jí)的水;
(六)基線噪聲
可能的原因:解決方法
1.氣泡(尖銳峰):流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓;
2.污染(隨機(jī)噪聲):清洗柱,凈化樣品,用HPLC級(jí)試劑;
3.檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲:更換氘燈;
4.電干擾(偶然噪聲):采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等);
5.檢測(cè)器中有氣泡:流動(dòng)相脫氣,加柱后背壓;
(七)峰拖尾
可能的原因:解決方法
1.柱超載:降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相;
2.峰干擾:清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相;
3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動(dòng)相PH值,鈍化樣品;
4.同前(四)4:同前(四)4;
5.同前(四)35.:同前(四)3;
6.死體積或柱外體積過大:連接點(diǎn)降至低,對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管;
7.柱效下降:用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱;
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