相差顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)是相同的,所不同的是它具有四部分特殊結(jié)構(gòu):即環(huán)狀光闌、相板、合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡及綠色濾光片。
1、環(huán)狀光欄。具有環(huán)形開孔的光欄。位于聚光器的前焦點(diǎn)平面上,光闌的直徑大小是與物鏡的放大倍數(shù)相匹配的,并有一個(gè)明視場(chǎng)光闌,與聚焦器一起組成轉(zhuǎn)盤聚光器。在使用時(shí)只要把相應(yīng)的光闌轉(zhuǎn)到光路即可。
2、相板。位于物鏡內(nèi)部的后焦平面上。相板上有兩個(gè)區(qū)域,直射光通過的部分叫“共軛面”,衍射光通過的部分叫“補(bǔ)償面”。帶有相板的物鏡叫相差物鏡,常以“Ph”字樣標(biāo)在物鏡外殼上。
相板上鍍有兩種不同的金屬膜:吸收膜和相位膜。吸收膜常為鉻、銀等金屬在真空中蒸發(fā)而鍍成的薄膜,它能把通過的光線吸收掉60%-93%,相位膜為氟化鎂等在真空中蒸發(fā)鍍成,它能把通過的光線相位推遲1/4波長。
根據(jù)需要,兩種膜有不同的鍍法,從而制造出不同類型的相差物鏡。如果吸收膜和相位膜都鍍?cè)谙喾吹墓曹椕嫔?,通過共軛面的直射光不但振幅減弱,而且相位也被推遲1/4λ,衍射光因通過物體時(shí)相位也被推遲1/4λ,這樣就使得直射光與衍射光維持在同一個(gè)相位上。根據(jù)相長干涉原理,合成光等于直射光與衍射光振幅之和,因背景只有直射光的照明,所以通過被檢物體的合成光就比背景明亮。這樣的效果叫負(fù)相差,鏡檢效果是暗中之明。
如果吸收膜鍍?cè)诠曹椕?,相位膜鍍?cè)谘a(bǔ)償面上,直射光僅被吸收,振幅減少,但相位未被推遲,而通過補(bǔ)償面的衍射光的相位,則被推遲了兩個(gè)1/4λ,因此衍射光的相位要比直射光相位落后1/2λ。根據(jù)相消干涉原理,這樣通過被檢物體的合成光要比背景暗,這種效果叫正相差,即鏡檢效果是明中之暗。
負(fù)相差物鏡(Negative contrast)用縮寫字母“N”表示,正相差物鏡(Positive contrast)用縮寫字母“P”表示,由于吸收膜對(duì)通過它的光線的透過率不同,可分為高、中、低及低低,如Olympus光的透過率分為:7%、15%、20%、40%四個(gè)等級(jí),因此分為高(High略寫為H),中(Medium略寫為M),低(Low略寫為L)及低低(Low-Low略寫成LL)四類,構(gòu)成了負(fù)高(NH)、負(fù)中(NM)、正低(PL)和正低低(PLL)四種類型相差物鏡,這些字母符號(hào)都寫在相差物鏡的外殼上??筛鶕?jù)被檢物體的特性來選擇使用不同類型的相差物鏡。
3、合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡。是相差顯微鏡一個(gè)極為重要的結(jié)構(gòu)。環(huán)狀光闌的像必須與相板共軛面*吻合,才能實(shí)現(xiàn)對(duì)直射光和衍射光的特殊處理。否則應(yīng)被吸收的直射光被泄掉,而不該吸收的衍射光反被吸收,應(yīng)推遲的相位有的不能被推遲,這樣就不能達(dá)到相差鏡檢的效果。由于環(huán)狀光闌是通過轉(zhuǎn)盤聚光器與物鏡相匹配的,因而環(huán)狀光闌與相板常不同軸。為此,相差顯微鏡配備有一個(gè)合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡(在鏡的外殼上標(biāo)有“CT”符號(hào)),用于合軸調(diào)節(jié)。使用時(shí)撥去一側(cè)目鏡,插入合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡,旋轉(zhuǎn)合軸調(diào)節(jié)望遠(yuǎn)鏡的焦點(diǎn),便能清楚看到一明一暗兩個(gè)圓環(huán)。再轉(zhuǎn)動(dòng)聚光器上的環(huán)狀光闌的兩個(gè)調(diào)節(jié)鈕,使明亮的環(huán)狀光闌圓環(huán)與暗的相板上共軛面暗環(huán)*重疊。如明亮的光環(huán)過小或過大,可調(diào)節(jié)聚光器的升降旋鈕,使兩環(huán)*吻合。如果聚光器已升到zui高點(diǎn)或降到zui低點(diǎn)而仍不能矯正,說明玻片太厚了,應(yīng)更換。調(diào)好后取下望遠(yuǎn)鏡,換上目鏡即可進(jìn)行鏡檢觀察。
4、綠色濾光片。由于使用的照明光線的波長不同,常引起相位的變化,為了獲得良好的相差效果,相差顯微鏡要求使用波長范圍比較窄的單色光,通常是用綠色濾光片來調(diào)整光源的波長。Olympus廠家生產(chǎn)的相差顯微鏡在鏡檢時(shí)要使用該廠規(guī)定的IF550綠色濾光片作為配套器件。
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