自主研發(fā)|原核重組蛋白Annexin V

閱讀：681 發(fā)布時間：2022-2-16

自主研發(fā)|原核重組蛋白Annexin V

背景介紹

膜聯(lián)蛋白是一種結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)有些類似的物質(zhì)，廣泛存在于包括細(xì)菌在內(nèi)的大多數(shù)生物中。膜聯(lián)蛋白也具有綁定磷脂分子和鈣的特性，大部分存在于細(xì)胞內(nèi)部，只有少數(shù)可以在外部發(fā)現(xiàn)。其中尤為廣泛應(yīng)用的Annexin V（annexin A5）作為一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，而在凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合脂質(zhì)雙層內(nèi)側(cè)分布的磷脂酰絲氨酸會由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。通過熒光素（FITC等）標(biāo)記的Annexin V是檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號	英文全稱
Recombinant Human ANXA5 Protein	P02380	Annexin A5

研發(fā)工藝

重組蛋白產(chǎn)品采用原核表達(dá)系統(tǒng)，通過基因克隆技術(shù)將外源目的基因，通過構(gòu)建表達(dá)載體并導(dǎo)入表達(dá)菌株的方法，使其在特定原核生物或細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。主要實驗技術(shù)包括：

● 外源基因的獲?。航M織、細(xì)胞RNA提取，cDNA文庫構(gòu)建，PCR擴(kuò)增技術(shù)

● 外源基因的轉(zhuǎn)入：酶切實驗，重組載體構(gòu)建，細(xì)胞感受態(tài)制作、轉(zhuǎn)化及培養(yǎng)

● 獲取陽性轉(zhuǎn)化子：質(zhì)粒提取，菌液PCR驗證及序列測序分析

● 誘導(dǎo)表達(dá)：IPTG誘導(dǎo)目的蛋白表達(dá)，SDS-PAGE電泳檢測，擴(kuò)大培養(yǎng)

● 純化及鑒定分析：親和層析純化，BSA法濃度鑒定

最終蛋白產(chǎn)品采用真空冷凍干燥技術(shù)，進(jìn)行凍干及超低溫保存。

SDS-PAGE鑒定

其他Annexin重組蛋白

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號	英文全稱
Recombinant Human ANXA1 Protein	P02742	Annexin A1
Recombinant Human ANXA2 Protein	P02379	Annexin A2
Recombinant Human ANXA3 Protein	P02489	Annexin A3
Recombinant Human ANXA7 Protein	P02495	Annexin A7
Recombinant Human ANXA8 Protein	P05757	Annexin A8