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Exosome(外泌體)1983年于綿羊網織紅細胞中被發(fā)現(xiàn)，是活細胞分泌的直徑約為30-150nm的膜性囊泡，包含多種活性分子，如蛋白質、脂肪和核酸（mRNA、miRNA及其它非編碼RNA）等，能作為信號分子傳遞給靶細胞，從而介導細胞間的物質傳遞與信息交流。天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳等。外泌體miRNA通過循環(huán)囊泡傳遞信息，被認為是細胞間信號交流的第三種途徑。除了miRNA外，研究表明外泌體中的circRNA、lncRNA和蛋白質也參與細胞內的信號調控。2013年，發(fā)現(xiàn)細胞囊泡
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（接上篇）三.抗生素及疫苗等抗感染藥物研發(fā)應用傳統(tǒng)方式對抗生素、疫苗等抗感染藥物在活體水平的研發(fā)篩選，需要在給藥后處死小鼠，取出感染部位，再通過PCR、菌落計數(shù)、切片觀察等方法對藥物治療效果進行評價。這些方式需要耗費大量實驗動物、進行繁瑣的實驗操作，很難實現(xiàn)高通量篩選，且不能利用同一只動物從頭到尾的獲取實驗數(shù)據，因此很難獲取準確的重復性數(shù)據。小動物活體光學成像技術是一種非侵入式活體觀測技術，無需在實驗過程中處死老鼠，并且可以使用同一批老鼠完成不同時間點的觀測，因此已廣泛應用于抗感染藥物的研發(fā)?？?/div>（接上期）二.監(jiān)測抗感染免疫反應在利用小動物活體光學成像技術觀測病原體在動物體內感染情況的同時，還可應用該技術觀測機體對病原體入侵的免疫反應。此類應用可以通過三種方式實現(xiàn)：1、利用報告基因標記在免疫細胞中特異性表達的基因啟動子而構建轉基因動物，以該轉基因動物為實驗模型，用經光學標記的病原體對其進行感染，觀測病原體感染而引發(fā)的免疫細胞應答；2、利用報告基因標記目的基因的啟動子構建轉基因動物，觀測病原體感染后該基因的表達情況，了解免疫應答的分子機理；3、利用某種免疫相關基因被敲除的基因敲除鼠作為實驗Q：熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途？a.啟動子結構分析，將啟動子區(qū)域序列（通常2k左右）進行分段截短，或對特定位點進行突變，再分別構建入luciferase報告載體，檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析，一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性，可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉錄因子同其調控序列的作用，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體，同時在實驗細胞中共轉過表達該轉錄因子，可分析轉錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否激活，將該信號通路的下IL-2具有免疫激活和免疫抑制雙重作用，具體發(fā)揮哪種取決于其受體不同鏈的相應信號。IL-2受體包括α、β、γ三條鏈，其中α鏈（IL-2Rα，CD25）在Treg細胞和內皮細胞組成性表達，使用低劑量IL-2藥物會優(yōu)先激活Treg細胞而非CD8+T細胞，而高劑量IL-2藥物會帶來嚴重的全身毒性，這是開發(fā)IL-2的腫瘤治療藥物中一直困擾著人們的難題。NatRevImmunol.2022Oct;22(10):614-628.多家企業(yè)已經將IL-2的研發(fā)轉向抗炎藥物方向（參考：不死磕“腫瘤”，IL-2轉向Revvity小動物活體光學成像技術已在生命科學基礎研究、臨床前醫(yī)學研究及藥物研發(fā)等領域得到廣泛應用。在眾多應用領域中，感染性疾病研究是活體光學成像技術的應用熱點之一。在應用活體光學成像技術進行感染性疾病研究中，常用的標記方法及應用領域包括：1、利用螢火蟲熒光素酶基因、海腎熒光素酶基因或細菌熒光素酶基因標記細菌、病毒、真菌、寄生蟲等病原體，在活體水平觀測這些病原體在動物體內的感染情況及抗生素、疫苗等藥物的治療效果；2、通過熒光素酶基因或熒光蛋白基因標記免疫細胞，以及利用特定基因-熒光素酶基因轉基小動物活體光學成像技術是將分子及細胞生物學技術從體外研究水平發(fā)展到活體動物研究水平的前沿性臨床前分子影像技術，該技術通過采用生物發(fā)光與熒光探針標記研究對象，借助靈敏的光學檢測儀器，直接在活體動物水平監(jiān)測疾病的發(fā)展變化并開展相關藥物的臨床前研發(fā)。小動物活體光學成像目前已廣泛應用于生物藥劑學及藥物動力學相關研究：以藥物為直接觀測對象，借助熒光探針直接標記藥物本身，通過追蹤熒光信號而反映藥物在體內的分布、靶向及代謝情況。如在研究抗體或多肽類藥物是否能夠有效靶向腫瘤的實驗中，可以利用熒光染料通過化學鍵的納米載體.傳統(tǒng)化藥.精準治療（從分子機制－細胞分析－活體動物－組織切片等多角度，研究納米金載體通過增加順鉑化療藥物靶向性，改善順鉑化療耐藥性，加快精準治療研究進程。）在上期推送中，我們介紹了順鉑作為一線化療藥物，在治療過程中會出現(xiàn)耐藥性，且耐藥機制不明。而納米載體可通過“特洛伊木馬”效應，通過抗體偶聯(lián)、控制釋放時間/環(huán)境和多靶標聯(lián)合治療等方式，增加藥物靶向性及治療效果。案例一納米金聯(lián)合順鉑改善三陰性乳腺癌放療效果[1]2017年LeiCui等人在RadiationResearch雜志上發(fā)表文章，
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