日常移液工作時,你有沒有這樣經(jīng)常糾結(jié)的情況?
從技術(shù)上來說,如果使用手動移液器,標(biāo)準(zhǔn)的操作技術(shù)只有2種:正向移液和反向移液。
正向移液就是吸液前先把操作按鈕按壓到第一停點,排液時將操作按鈕按壓到第二停點排出所有液體,也就是一檔吸二檔排。
反向移液在轉(zhuǎn)移部分“問題液體”時能獲得比正向移液更好的效果,常見應(yīng)用場景有:
這是什么原理呢?
當(dāng)進(jìn)行反向移液時,吸液前需將操作按鈕按壓至第二停點。這樣額外的液體體積將被吸入到吸頭中。排液時,僅將操作按鈕按壓至第一停點以排出目標(biāo)容量的液體。多余的液體可繼續(xù)用于反向移液或直接廢棄。
在上述應(yīng)用場景中,液體粘附在吸頭表面或揮發(fā)到空氣中所造成的體積損失由多吸的液體進(jìn)行補償,而不會影響到目標(biāo)體積。
然而也有人提出了一些疑問和顧慮(結(jié)尾彩蛋有解答哦):
——每次都要多吸一些液體,會浪費很多試劑吧?
——吸液時不能滿量程吧,否則要吸到移液器里面了。
——試劑好貴,這么用太費了吧?
——這樣相當(dāng)于吸一次要排兩次,操作不太方便呢。
——就算這樣操作,吸粘稠液體還是很費勁啊。
的確,選擇哪種操作技巧需要多方面考慮。移液技巧千萬條,適合實驗第一條!如果僅從結(jié)果的精準(zhǔn)度出發(fā),使用反向移液對部分應(yīng)用場景的精準(zhǔn)度提升會有很大的幫助。但如果實驗的成本或其他因素的影響更大,如何操作就可酌情考慮。
下文還有一些小彩蛋,希望能幫到你
反向移液的進(jìn)階技巧——連續(xù)操作
如果進(jìn)行相同試劑的連續(xù)加樣,且無交叉污染風(fēng)險時,可考慮反向移液的連續(xù)操作。操作方法嘛……跟我一起把咒語念起來:201010101010……10120。
糊涂了吧?其實很簡單的!容我翻譯一下:裝完吸頭后把操作按鈕按壓到二檔(2)吸液(0),排液時把操作按鈕按到一檔(1),保持按壓在一檔的狀態(tài)再把吸頭浸入液面下松開吸液(0),排液時按到一檔(1)……直到最后一次加樣結(jié)束,保持按壓在一檔(1),移動到廢液槽把操作按鈕按到二檔(2),松開操作按鈕(0),退吸頭。操作不難,試劑損耗也減少了,你學(xué)“費”了嗎?
擔(dān)心反向移液會把液體反向吸到移液器里?大可不必!
絕大部分吸頭的設(shè)計都考慮到了反向移液操作,畢竟是常規(guī)操作嘛。不過如果用的是濾芯吸頭,的確需要事先擔(dān)心一下。
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