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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
12641ES01雙鏈DNA（dsDNA）定量試劑
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 12641ES01 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：1102更新時(shí)間：2023-07-20 23:50:15
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1kit |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | 12641ES01 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品描述
Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料，其僅在與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出熒光，且所產(chǎn)生的熒光與DNA濃度呈正比，因而可用于精確測(cè)量多個(gè)來(lái)源的dsDNA，包括基因組DNA、病毒DNA、PCR擴(kuò)增產(chǎn)物、測(cè)序文庫(kù)等。
本產(chǎn)品Picogreen dsDNA Quantitation Reagent定量具有以下優(yōu)勢(shì)：①靈敏度高：可檢測(cè)低至200 pg的dsDNA，節(jié)省寶貴樣品；②特異性強(qiáng)：在等摩爾的RNA存在的條件下，對(duì)dsDNA具有特異性；③耐受性好：耐受較高濃度的鹽、尿素、乙醇、氯仿、去垢劑、蛋白或瓊脂糖，可以直接定量PCR擴(kuò)增產(chǎn)物而無(wú)需從反應(yīng)混合物中純化DNA。④易于使用——只需在樣品中加入染料，等待5分鐘，然后讀數(shù)即可，且適用于96和384孔板；與大多數(shù)基于熒光的酶標(biāo)儀和熒光計(jì)兼容。⑤適用范圍廣：可適用于PCR的分析、芯片樣品、DNA損傷分析、酶活分析、基因組DNA定量以及復(fù)雜混合物中dsDNA的檢測(cè)和病毒DNA定量等多種領(lǐng)域。
運(yùn)輸和保存方法
室溫運(yùn)輸。-20℃避光密封保存，有效期2年。
注意事項(xiàng)
1. Picogreen定量試劑含有DMSO（已知有毒試劑），請(qǐng)小心操作；
2. 盡管目前尚未有數(shù)據(jù)表明Picogreen具有誘變性和毒性，但是該試劑能結(jié)合雙鏈DNA，請(qǐng)操作時(shí)務(wù)必小心；
3. 為了您的健康，實(shí)驗(yàn)操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服和戴一次性手套。
4. 本產(chǎn)品僅用作科研用途！
應(yīng)用實(shí)例
【注】：本方法參照2010《中國(guó)藥典》進(jìn)行操作。
1．染料工作液的配置
PicoGreen dsDNA定量試劑取出后回溫至室溫，該試劑是以100 µL 200×的濃縮液形式保存于無(wú)水DMSO中的。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，根據(jù)實(shí)驗(yàn)用量用1×TE（10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5）按1:200 的比例稀釋PicoGreen濃縮液。
【注】：1）由于試劑容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。
2）PicoGreen試劑見(jiàn)光易降解，所以應(yīng)將配好的溶液用鋁箔包住或放置暗處避光保存。
3）溶液最好在配制好數(shù)小時(shí)內(nèi)使用，以保證最佳結(jié)果。
2．標(biāo)準(zhǔn)品工作液的配制
取λDNA標(biāo)準(zhǔn)品，用無(wú)菌TE buffer配制成100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品工作液。
【注】：標(biāo)準(zhǔn)品也可用其他已知濃度的純化DNA；有一些產(chǎn)品描述可使用小牛胸腺DNA作為標(biāo)準(zhǔn)品，按照我們實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)，并不推薦它作為標(biāo)準(zhǔn)品。
3．標(biāo)準(zhǔn)品工作液稀釋
1) 母液稀釋：使用TE緩沖液將100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為2 μg/mL。
2) 梯度稀釋：參照表1，對(duì)DNA標(biāo)品母液進(jìn)行梯度稀釋。
表1 標(biāo)曲制作
TE體積（μL）
2 μg∕mL DNA標(biāo)準(zhǔn)品母液（μL）
Picogreen染料工作液（μL）
DNA標(biāo)準(zhǔn)品終濃度
0
1,000
1,000
1 μg/mL
900
100
1,000
100 ng/mL
990
10
1,000
10 ng/mL
999
1
1,000
1 ng/mL
1,000
0
1,000
Blank
3) 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：向經(jīng)稀釋的各梯度標(biāo)準(zhǔn)品溶液中加入1 mL染料工作液混勻，避光室溫孵育5 min。使用酶標(biāo)儀或熒光計(jì)檢測(cè)熒光強(qiáng)度（Ex=480 nm，Em=520 nm）；將溶液加入比色皿或取200 μL加入微孔板，確信不要在樣品中引入氣泡；以1×TE緩沖液空白對(duì)照，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品熒光值；用標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度（ng/mL）對(duì)應(yīng)的熒光強(qiáng)度作直線回歸，制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
4) 測(cè)量剩余樣品的熒光值：熒光計(jì)將給出一個(gè)直接的濃度讀數(shù)，數(shù)據(jù)可以用來(lái)產(chǎn)生DNA濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
HB220615
