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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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12608ES24Hieff NGSTM Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- 12608ES24 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：936更新時間：2022-02-10 10:22:38
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 8 T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | 12608ES24 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module 快速末端修復/A尾添加模塊 | 12608ES24 | 24 T | 3865.00 |
12608ES96 | 96 T | 11765.00 |
產(chǎn)品描述
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module是針對Illumina®高通量測序平臺文庫構(gòu)建而專業(yè)設計的DNA末端修復/A尾添加模塊，具有高效、快速、易實現(xiàn)自動化的優(yōu)勢。本產(chǎn)品兼容1 ng-1 μg片段化Input DNA，可在單管內(nèi)實現(xiàn)片段化DNA的末端補平、5'端磷酸化和3'端加A尾反應，得到5'末端含磷酸基團且3'末端帶有dA突出的DNA產(chǎn)物。該產(chǎn)物無需純化，即可使用Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607）進行文庫構(gòu)建接頭連接反應。
本產(chǎn)品已與Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace®Ⅱ High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文庫構(gòu)建，通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。本產(chǎn)品中提供的所有試劑組分均經(jīng)過嚴格質(zhì)檢，最高程度保障產(chǎn)品優(yōu)異性能與批間穩(wěn)定性。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 24 T | 96 T |
12608-A | End Repair/dA-Tailing Buffer | 144 μL | 576 μL |
12608-B | End Repair/dA-Tailing Enzyme | 96 μL | 384 μL |
質(zhì)量控制
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme
1. SDS-PAGE純度：>95%。
2. 核酸內(nèi)切酶活性：50 μL反應體系中加入10 μL本酶和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小時。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測,RF II轉(zhuǎn)化比率<10%。
3. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性檢測緩沖液中加入10 μL本酶和2.5 mM對硝基苯磷酸，37°C孵育4小時。經(jīng)光譜測定法檢測，405 nm處無對硝基苯陰離子特征吸收峰。
4. 功能活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Enzyme中加入1 μL本酶和0.5 μg包含5'和3'突出末端的片段化DNA，25°C孵育20分鐘。經(jīng)毛細管電泳檢測，末端修復、加dA尾并磷酸化的DNA比率>95%。
Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer
1. 16小時孵育檢測：50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg HindIII-λDNA，37°C孵育16小時。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，條帶無降解；50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg T3 DNA，37°C孵育16小時。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，條帶無降解。
2. 核酸內(nèi)切酶活性：50 μL反應體系中包含1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和1 μg φX174 RF I DNA，37°C孵育4小時。經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳檢測，RF II轉(zhuǎn)化比<10%。
3. RNase活性：在1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer中加入40 ng FAM-RNA，37°C孵育16小時。經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，條帶無降解。
4. 磷酸酶活性：在磷酸酶活性檢測緩沖液中加入1×Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Buffer和2.5 mM對硝基苯磷酸，37°C下孵育4小時。經(jīng)光譜測定法檢測，405 nm處無對硝基苯陰離子特征吸收峰。
測序驗證
本品與Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module（Cat#12607），2×Hieff Canace® High-Fidelity Mix for Library Amplification（Cat#12620）共同用于DNA文庫構(gòu)建，已通過Illumina®高通量平臺測序驗證其有效性。
運輸與保存方法
冰袋運輸。
-20℃保存，有效期1年。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 將表1中各試劑解凍后，顛倒混勻，置于冰上備用。
2. 于無菌PCR管中配制表1所示反應體系。
表1 末端修復/dA尾添加PCR反應體系
名稱 | 體積（μL） |
Fragmented DNA | x |
End Repair/dA-Tailing Buffer | 6 |
End Repair/dA-Tailing Enzyme | 4 |
ddH2O | Up to 60 μL |
3. 使用移液器輕輕吹打或振蕩混勻，并短暫離心將反應液離心至管底。
4. 將上述PCR管置于PCR儀，設置表2所示反應程序，進行末端修復/dA尾添加反應。
表2 末端修復/dA尾添加PCR反應程序
溫度 | 時間 |
熱蓋105°C | On |
30°C | 20 min |
72°C | 20 min |
4°C | Hold |
5. 產(chǎn)物如需純化，可使用Hieff NGS® DNA Selection Beads（Cat#12601）或AMPure XP Beads（Cat#A63880）或其他等效產(chǎn)品。
相關(guān)產(chǎn)品
建庫試劑盒 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® MaxUp Dual-mode mRNA Library Prep Kit for Illumina® | 12301ES08/24/96 | 8/24/96 T | 3826/9756/32856 |
Hieff NGS® MaxUpⅡ DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12200ES24/96 | 24/96T | 6486/23567 |
Hieff NGS® MaxUp DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12201ES24/96 | 24/96T | 4626/16626 |
Hieff NGS® OnePot DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12203ES24/96 | 24/96 T | 7486/28567 |
Hieff NGS® Fast Tagment DNA Library Prep Kit for Illumina® | 12206ES08/24/96 | 8/24/96 T | 2355/6155/23855 |
文庫構(gòu)建磁珠 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® cfDNA Clean Beads（100~200 bp） | 12599ES08/56 | 5/60 mL | 1666/9106 |
Hieff NGS® Smarter DNA Clean beads (50 bp以上） | 12600ES08/56 | 5/60 mL | 1386/7586 |
Hieff NGS® DNA Selection Beads（Superior AMPure XP alternative） | 12601ES08/56 | 5/60 mL | 986/6286 |
Hieff NGS® mRNA Isolation Master Kit | 12603ES24/96 | 24/96 T | 616/2266 |
建庫接頭 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1 | 12615ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2 | 12616ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3 | 12617ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4 | 12618ES04/16 | 12×4/12×16 T | 1256/4536 |
Hieff NGS® Tagment Index Kit for Illumina®,(96 Index) | 12610ES96 | 96 T | 1365 |
建庫模塊 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® Fast-Pace DNA Ligation Module | 12607ES08/24/96 | 8/24/96 T | 1423/3263/10863 |
Hieff NGS® Fast-Pace End Repair/dA-Tailing Module | 12608ES24/96 | 24/96 T | 2066/6166 |
2×Super Canace® II High-Fidelity Mix for Library Amplification | 12621ES24/96 | 24/96 T | 583/1783 |
Hieff NGS® Dual-Mode cDNA Synthesis Kit | 12250ES24/96 | 24/96 T | 4885/16485 |
文庫定量 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, qPCR Master Mix | 12302ES05 | 500 T | 1526 |
Hieff NGS® Library Quantification Kit for Illumina®, DNA Standard (1-6) | 12307ES09 | 6×96 μL | 2126 |
dsDNA HS Assay Kit for Qubit® | 12640ES60/76 | 100/500 T | 686/2696 |
多重PCR | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 價格（元） |
Hieff® Multiplex PCR Kit | 12279ES50/76 | 100/500 T | 875/3165 |
Hieff® Multiplex PCR Master Mix | 12280ES50/76 | 50 /200 T | 875/3165 |
