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- 40767ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):4292更新時間:2022-02-10 15:00:26
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LysoSensor™ Green DND-189
溶酶體綠色熒光探針
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
40767ES50 | LysoSensor™ Green DND-189 溶酶體綠色熒光探針 | 50 μl | -20℃避光 | 359.00 |
產(chǎn)品描述
LysoSensor®系列探針是主要對活細(xì)胞中的酸性區(qū)室(如溶酶體、頂體精子)動態(tài)合成和功能進(jìn)行研究的一類熒光探針,該類探針的染色具有向酸性,可通過質(zhì)子化作用在酸性細(xì)胞器內(nèi)累積。該類探針的這種質(zhì)子化作用還可解除染料的熒光淬滅性,使其所發(fā)射的熒光強(qiáng)度更強(qiáng)。因此,與LysoTracker系列探針相比,LysoSensor®系列探針隨著細(xì)胞器的酸化程度其熒光強(qiáng)度呈pH依賴型(向酸)增強(qiáng)。
本品LysoSensor™ Green DND-189具有較低的pKa值,僅在酸性區(qū)室內(nèi)才具有熒光。本品以溶于無水DMSO的1 mM儲存液形式提供。
如對活細(xì)胞中的酸性區(qū)室進(jìn)行選擇性標(biāo)記和染色,可選擇LysoTracker®系列探針。
產(chǎn)品性質(zhì)
分子式(Molecular Formula) | C24H22N4O2 |
分子量(Molecular Weight) | 398.46 |
Ex/Em | 443⁄505 |
pKa | ~5.2 |
顏色(Color) | 綠色 |
結(jié)構(gòu)式(Structure) |
|
運輸和保存方法
冰袋運輸。-20℃避光干燥保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
注意事項
1)不能儲存在無霜冰箱,建議按照單次用量分裝于-20℃凍存。
2)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
使用前,先將本品取出回溫至室溫,并對其進(jìn)行簡短離心使DMSO溶液集中于管底。*工作濃度需根據(jù)不同的實驗要求、細(xì)胞類型、細(xì)胞或組織的膜通透性等進(jìn)行優(yōu)化。
1. 工作液的配制
利用培養(yǎng)基或合適的緩沖液將1 mM 儲存液稀釋至工作濃度,推薦工作液濃度至少為1 µM;
【注1】:為了降低探針加載過度可能引起的假陽性,建議在不影響染色效果的情況下盡量使用低濃度。2)若細(xì)胞在染色后于不含染料的培養(yǎng)基中孵育,會觀察到熒光信號的衰減和細(xì)胞的空泡化現(xiàn)象。
【注2】:工作液現(xiàn)配現(xiàn)用。
2. 染色
2.1 對于貼壁細(xì)胞
1)將細(xì)胞置于培養(yǎng)皿中的蓋玻片上,加入合適培養(yǎng)基,使其爬片生長。
2)待細(xì)胞生長到合適豐度,吸除培養(yǎng)液,加入適量37℃預(yù)熱的含探針工作液。于生長狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體孵育時間需根據(jù)細(xì)胞類型而定)。
3)利用新鮮培養(yǎng)基替換上述染色液并在熒光顯微鏡(含合適濾片)下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或延長染色時間。
2.2 對于懸浮細(xì)胞
1)離心,吸除上清。
2)利用37℃預(yù)熱的探針工作液重懸細(xì)胞,于生長狀態(tài)下孵育30 min~2 h(具體時間需根據(jù)細(xì)胞類型而定)。
3)離心,吸除染色液,加入新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
4)置于熒光鏡下觀察。若染色不夠充分,建議增加染料濃度或加長染色時間。
【注】:對于懸浮細(xì)胞,也可將細(xì)胞貼附于經(jīng)BD Cell-Tak處理過的蓋玻片上,然后使用類似于貼壁細(xì)胞的方法進(jìn)行染色。
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