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20128ES50Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 20128ES50 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：606更新時間：2022-02-10 11:44:30
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產(chǎn)品簡介
本試劑盒可用于快速便捷分離組織/細(xì)胞線粒體，獲得的線粒體純度較高，且絕大部分都含有完整的內(nèi)膜和外膜，可用于線粒體的生理功能等方面的研究，得到的線粒體也可被相應(yīng)裂解液裂解得到線粒體蛋白
產(chǎn)品介紹
Cat#: 20128 冰袋運(yùn)輸 & -20℃保存 |
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組織/細(xì)胞線粒體分離試劑盒 Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue | |
使用手冊V1.0 | |
本產(chǎn)品僅作科研用途！ 上海翊圣生物科技有限公司 ：4006-111-883 : order@yeasen.com | |
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格（元） |
Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue 組織/細(xì)胞線粒體分離試劑盒 | 20128ES50 | 50T | -20℃ | 428.00 |
Mitochondria Isolation Kit for Cell and Tissue 組織/細(xì)胞線粒體分離試劑盒 | 20128ES60 | 100T | -20℃ | 768.00 |
產(chǎn)品描述
線粒體是絕大多數(shù)真核細(xì)胞內(nèi)的一種基本的重要的細(xì)胞器，是細(xì)胞的動力工廠，細(xì)胞進(jìn)行氧化磷酸化的場所。因此，對線粒體進(jìn)行分離，以此為對象，對線粒體呼吸作用、mtDNA、mtRNA以及其他線粒體蛋白性能分析等具有重要意義。
本試劑盒可用于快速便捷分離組織/細(xì)胞線粒體，獲得的線粒體純度較高，且絕大部分都含有完整的內(nèi)膜和外膜，可用于線粒體的生理功能等方面的研究，得到的線粒體也可被相應(yīng)裂解液裂解得到線粒體蛋白，從而用于后續(xù)SDS-PAGE、Western、雙向電泳及免疫共沉淀等分析。
按照每個樣品使用量（細(xì)胞1-5 × 107個；組織：100-200 mg），20128ES50/20128ES60可分別進(jìn)行50個和100個樣品的抽提。
產(chǎn)品組分
組分編號 | 組分名稱 | 產(chǎn)品編號/規(guī)格 | |
20128ES50(50T) | 20128ES60(100T) | ||
20128-A | Reagent A試劑A | 100ml | 100ml×2 |
20128-B | Reagent B試劑B | 50ml | 100ml |
20128-C | Reagent C試劑C | 1ml | 2ml |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。
注意事項
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1 線粒體的抽提
1）樣本處理
① 組織勻漿：稱取100-200 mg新鮮組織，PBS或生理鹽水沖洗干凈，濾紙吸干，用剪刀剪成非常小的碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1-2.5mL冰預(yù)冷的試劑A，混勻，孵育8-10min，勻漿10-30下左右，也可采用超聲方法破膜。
② 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800 g 離心5-10 min收集細(xì)胞。計數(shù)，每次提取需要1-5 × 107個細(xì)胞，加入1-2.5mL預(yù)冷的試劑A，重懸細(xì)胞，混勻，孵育8-10min，可以采用超聲或勻漿器方法破膜。
2）將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4 oC，800 g 離心5 min。
【注】：細(xì)胞核、大的膜碎片、未裂解細(xì)胞等沉淀在管底。
3）收集上清液并轉(zhuǎn)移到新的離心管。4 oC，800 g 再次離心5 min。棄沉淀。
4）將上清液轉(zhuǎn)移到新的離心管。4 oC，12,000 × g 離心10 min，小心去除上清，沉淀即為分離得到的細(xì)胞線粒體。
【注】：離心后的上清含胞漿成分，盡量除去上清。
2 線粒體蛋白的抽提
1）向每毫升預(yù)冷試劑B加入10μL試劑C混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2）按每10μL線粒體壓積中，加入100μL上述配制好的試劑B/C溶液。
3）置于4℃旋渦振蕩15-30 min 。
4）10,000rpm，4℃離心15min，取上清，即為線粒體全蛋白提取物，進(jìn)行蛋白定量。
5）分裝保存于-70℃，避免反復(fù)凍融。
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