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參考價: | 面議 |
- 40912ES02 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):511更新時間:2017-05-23 17:36:59
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Coelenterazine e 腔腸素e
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Coelenterazine e 腔腸素e | 40912ES02 | 1×500μg | -20℃避光 | 1329.00 |
40912ES03 | 2×500μg | -20℃避光 | 2359.00 |
背景描述
腔腸素(Coelenterazine)是自然界中資源zui豐富的天然熒光素,是絕大多數(shù)海洋發(fā)光生物(超過75%)的光能貯存分子。腔腸素可作為許多熒光素酶的底物,比如海腎熒光素酶(Rluc),Gaussia分泌型熒光素酶(Gluc),以及包括水母發(fā)光蛋白(aequorin)和藪枝螅發(fā)光蛋白(Obelia)在內(nèi)的光蛋白(Photoproteins)。其發(fā)光原理是:以腔腸素為底物的熒光素酶在有分子氧的條件下,氧化腔腸素,產(chǎn)生高能量的中間產(chǎn)物,并在此過程中發(fā)射藍(lán)色光,峰值發(fā)射波長約為450~480nm。
腔腸素作為水母發(fā)光蛋白復(fù)合物(Aequorin)的組成成分,只有與鈣離子(Ca2+)結(jié)合后,才能被氧化生成高能量產(chǎn)物Coelenteramide,同時釋放出CO2和藍(lán)色熒光(~466nm)。其具有以下幾個優(yōu)點:1)能檢測較大范圍的Ca2+濃度(0.1-100μM);2)樣品無自體熒光,背景熒光較低,盡管信號較熒光鈣離子指示劑弱,但信噪比更高,因此具有較高靈敏度;3)Aequorin能夠穩(wěn)定維持在細(xì)胞內(nèi),能夠進行數(shù)小時至數(shù)天Ca2+的監(jiān)測。
圖1. 腔腸素作為水母發(fā)光蛋白輔助因子的Ca2+依賴反應(yīng)流程
腔腸素具有能量轉(zhuǎn)移(Bioluminescence Resonance Energy Transfer,BRET)的特性:在底物腔腸素存在的情況下,熒光素酶(如Rluc)催化底物發(fā)生藍(lán)光,能量轉(zhuǎn)移到EYFP(增強的黃色熒光蛋白),發(fā)出綠光(~530nm)。通過Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白兩者間的相互關(guān)系研究蛋白-蛋白之間的相互作用。BRET的信號可通過比較綠光和藍(lán)光的量來進行測定,消減了因細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞類型和其他實驗變量而引起的數(shù)據(jù)變量。
主要應(yīng)用
1. 活體成像。
2. 報告基因檢測。
3. 檢測細(xì)胞/組織內(nèi)活性氧(ROS)水平:細(xì)胞和組織內(nèi)的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子能夠增強腔腸素在酶非依賴性的氧化體系中自發(fā)熒光。
4. 高通量篩選。
5. 監(jiān)測活細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平。
產(chǎn)品描述
腔腸素e系天然腔腸素衍生物,結(jié)構(gòu)上比天然腔腸素多一個乙基。作為海腎熒光素酶的底物,其熒光強度是天然腔腸素的137%。腔腸素e具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性,且具有雙發(fā)射峰(405nm、465nm),從而可在pCa 5-7范圍內(nèi)通過雙波長的比例測定Ca2+濃度。該法不依賴于腔腸素濃度,可提高檢測精確性。
產(chǎn)品性質(zhì)
英文別名(English synonym) | e-CTZ; e Coelenterazine |
CAS號(CAS NO.) | 114496-02-5 |
分子式(Formula) | C28H23N2O3 |
分子量(Molecular weight) | 449.5g/mol |
溶解性(Solubility) | 溶于甲醇或者乙醇,不溶于DMSO |
外觀(Apperance) | 黃色至橘色固體 |
純度(Purity)(TLC) | ≥95% |
結(jié)構(gòu)(Structure) |
運輸和保存方法
冰袋運輸。粉末-20℃避光干燥保存,保存在惰性氣體環(huán)境下,避免接觸空氣。
使用方法
- e工作液的配制
- e-CTZ水溶液中不穩(wěn)定,建議使用前配制新鮮工作液
1. 溶解e-CTZ粉末于酸化乙醇,配制成1mg/ml儲存液;
2. 利用配好的儲存液稀釋到合適濃度的水溶液,如用于光度計分析的濃度為100μM;
3. 將儲存液于-80℃凍存。切忌凍存水溶性工作液,工作液會被氧化而明顯降低e-CTZ活性。
注意事項
1. 腔腸素e粉末使用惰性氣體(如氮氣或氬氣),在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃,長期保存于-70℃。管內(nèi)即使有少量空氣進入,也可能造成腔腸素e氧化失活,使量化分析的結(jié)果難以在不同試驗間進行比較。
2. 腔腸素e細(xì)胞通透性較差,因此對于細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度測定的相關(guān)實驗,精確度無法保證。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
附錄1. 腔腸素及其衍生物的特性
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 基本描述 | Em (nm) | RLC* | Relative Intensity | Half-rise time (ms)** |
40904 | 天然腔腸素 Coelenterazine native | 水母發(fā)光蛋白的輔助因子,高靈敏度化學(xué)發(fā)光法檢測Ca2+濃度(0.1~100µM)。常用作Rluc和Gluc等熒光素酶的報告基因檢測底物。BRET分析,以及細(xì)胞/組織樣本中的超氧陰離子和過氧化亞硝基陰離子的化學(xué)發(fā)光檢測??焖僭偕芰Ρ容^重要的實驗推薦使用本底物。 | 466 | 1.00 | 1 | 6-30 |
40906 | 腔腸素h Coelenterazine h | 一種水母發(fā)光蛋白復(fù)合物,其發(fā)光強度比天然腔腸素高10倍以上。適用于報告基因分析。 | 466 | 0.75 | 16 | 6-30 |
40910 | 腔腸素hcp Coelenterazine hcp | 腔腸素hcp-水母發(fā)光蛋白復(fù)合物的熒光強度比天然腔腸素復(fù)合物高190倍,且量子產(chǎn)量高和Ca2+反應(yīng)速度快。 | 445 | 0.65 | 500 | 2-5 |
40909 | 腔腸素cp Coelenterazine cp | Coelenterazine cp 光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強度是天然腔腸素的15倍,且具有更快的Ca2+反應(yīng)性。 | 442 | 0.63 | 28 | 2-5 |
40908 | 腔腸素f Coelenterazine f | 腔腸素f-光蛋白復(fù)合物的發(fā)光強度是天然腔腸素的20倍。其具有的細(xì)胞滲透性。當(dāng)需要*的檢測Ca2+靈敏度研究水母蛋白再生實驗研究中,推薦使用本底物。 | 472 | 0.80 | 20 | 6-30 |
40911 | 腔腸素n Coelenterazine n | 所有的腔腸素衍生物中熒光強度是zui弱的,且對Ca2+反應(yīng)速率也明顯低于天然腔腸素。非常有用的Ca2+低靈敏檢測底物。 | 468 | 0.25 | 0.15 | 6-30 |
40912 | 腔腸素e Coelenterazine e | 具有zui高的體外水母發(fā)光蛋白反應(yīng)性,且具有雙發(fā)射峰,可在pCa5-7范圍內(nèi)通過雙波長的比例測定Ca2+濃度,從而提高檢測精確性。腔腸素e的熒光強度是天然腔腸素的137%。 | 405 & 465 | 0.5 | 4 | 0.15-0.3 |
40913 | 2-methyl Coelenterazine 二甲基腔腸素 | 可高效作用于ROS(如單態(tài)氧、超氧陰離子),是一種已報道的強抗氧化劑。 | / | / | / | / |
40905 | 腔腸素 400a Coelenterazine 400a | BRET研究中Rluc的*底物。在390nm和400nm之間發(fā)藍(lán)色光,對GFP受體蛋白的光發(fā)射干擾zui小。不可作為Gluc底物。 | 400 | / | / | / |
*RLC = relative luminescence capacity : Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+ relative to native aequorin = 1.0 **Half-Rise Time : The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50% of the maximum after addition of 1mM Ca2+ to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest. All data are from O. Shimomura in Cell Calcium 14, 373 (1993). |
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40906ES03 | 2×500μg | 2359.00 | |
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40908ES03 | 2×500μg | 2359.00 | |
Coelenterazine cp 腔腸素cp | 40909ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine hcp 腔腸素hcp | 40910ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine n 腔腸素n | 40911ES72 | 1×250μg | 2359.00 |
Coelenterazine 2-methyl 二甲基腔腸素 | 40913ES50 | 1×50μg | 929.00 |