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酶標(biāo)儀的靈敏度和準(zhǔn)確度監(jiān)測方法分享
閱讀:2575發(fā)布時間:2021-5-26
酶標(biāo)儀主要應(yīng)用于生物教學(xué)、科研、實驗等領(lǐng)域。適合微生物、動植物、食品檢驗等實驗分析,也非常適合基層醫(yī)院臨床檢測使用。 該儀器檢測自動化,智能化,適合批量樣品數(shù)據(jù)檢測。人機(jī)交互性能好。操作使用簡便。精度高,穩(wěn)定度好,特別適合低刻度、小劑量的分子生物領(lǐng)域檢測使用。
酶標(biāo)儀的理論基礎(chǔ):
酶標(biāo)儀的濾光片質(zhì)量好壞,直接影響儀器的靈敏度高低,而濾光片的質(zhì)量又是以其波長精度及其峰值指標(biāo)來衡量的,因此濾光片波長精度及峰值是衡量酶標(biāo)儀的重要參數(shù)之一,這在廠家的儀器說明書中雖未曾提及,但在儀器的實際使用過程中,我們發(fā)現(xiàn)對濾光片波長精度和峰值進(jìn)行檢查是重要的也是必要的,通過檢查可以發(fā)現(xiàn)濾光片的波長標(biāo)定值與實測值的符合程度,可以發(fā)現(xiàn)濾光片的質(zhì)量是否符合要求。
酶標(biāo)儀的靈敏度和準(zhǔn)確度的監(jiān)測
方法:①靈敏度:準(zhǔn)確配制6ug/ml重鉻酸鉀(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解),加入200ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中,以0.05mo1/L硫酸溶液作空白,于450nm(參比波長650nm)測定,其吸光度應(yīng)≥0.01A。②準(zhǔn)確度:準(zhǔn)確配制:1mmo/L對硝基苯酚(提純品)水溶液,然后以10mmo1/L氫氧化鈉溶液25倍稀釋之,加入200ul稀釋液于小孔杯中,以10mmo1/LNaOH溶液作空白,于405nm(參比波長650nm)檢測,其吸光度應(yīng)在0.4A(0.395~0.408A)左右。
說明:儀器的靈敏度和準(zhǔn)確度主要受兩個因素影響:一是濾光片波長的精度,二是檢測器的質(zhì)量。通常情況下,濾光片原因?qū)е聝x器的靈敏度和準(zhǔn)確度下降比較容易檢查;而檢測器質(zhì)量差異則不易被發(fā)現(xiàn),因此我們采用上述兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液對儀器檢測器的質(zhì)量進(jìn)行定期監(jiān)測,從而保證了儀器檢測結(jié)果的可靠性。對于儀器準(zhǔn)確性的測定,我們采用了文獻(xiàn)報道的方法,經(jīng)過多次在不同型號儀器間進(jìn)行反復(fù)測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該標(biāo)準(zhǔn)物溶液在450nm波長處有一較為恒定的測定值,由于酶標(biāo)儀與其它分光光度計的光學(xué)原理不*相同,故是否可以作為評價酶標(biāo)儀準(zhǔn)確性的參考方法還有待同行進(jìn)一步研究考證。
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