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BEL-7402細胞|慧穎科研用|人肝癌細胞

參   考   價:面議
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產(chǎn)品型號:

品       牌:ATCC

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:上海市

更新時間:2024-08-11 16:16:02瀏覽次數(shù):910

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產(chǎn)品名稱:BEL-7402細胞

中文名稱:人肝癌細胞

培養(yǎng)基:RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2

消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液,消化 5-10min

傳化比例:1:3 -1:5

換液時間:2-3 天換液一次

凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存

細胞介紹:BEL-7402 細胞為人肝癌細胞,來源于人肝癌,中文名為人肝癌細胞, 正常的細胞形態(tài)為上皮樣,貼壁生長。BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標本中建立的。 細胞群體倍增時間為20小時。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。 細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維,與臨床肝癌細胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時,其有絲分裂指數(shù)約為7%。 BEL-7402細胞的染色體數(shù)為不足三倍體,有一個異常的近端著絲點染色體。 間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同,而與人胚肝及臨床肝癌相近。

BEL-7402細胞|慧穎科研用|人肝癌細胞 操作說明

懸浮生長細胞的傳代:直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞,1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁生長細胞的傳代:吸去培養(yǎng)液,用PBS洗滌細胞一次,加入消化液,在37℃中消化約3~10分鐘,待細胞開始脫落時,倒去消化液,加入新鮮培養(yǎng)液,懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落,500×g離心5分鐘,去除消化液,用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞。1:3或1:5稀釋細胞后,分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2)細胞株的凍存:

1. 取培養(yǎng)2~3天生長旺盛的細胞,用細胞培養(yǎng)液將細胞配成2×106~2×107/ml。

2. 在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液,0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜(或甘油),混勻后密封。置4℃ 1小時,-20℃ 2小時,然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3)細胞株的復(fù)蘇:復(fù)蘇時,從液氮中取出凍存管,立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15%小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中,置37℃ 5%CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng);帖壁細胞則培養(yǎng)2~3小時,待細胞帖壁后,倒去培養(yǎng)液,更換新鮮的上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后,500×g離心5分鐘,去上清液,加入新鮮培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。

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