產(chǎn)品名稱:人幽門螺旋桿菌 (Hp)Elisa試劑盒
英文名稱:Human Hp ELISA Kit
方法:定性Elisa
規(guī)格:48T/96T
特惠價(jià)格:致電
適合樣本:血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等相關(guān)體液
保存溫度:4°C,避光保存
有效期:6個(gè)月
人幽門螺旋桿菌(Hp)Elisa試劑盒(定性)實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中人幽門螺旋桿菌 (Hp)。用純化的人幽門螺旋桿菌 (Hp)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中幽門螺旋桿菌 (Hp)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的幽門螺旋桿菌 (Hp)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中人幽門螺旋桿菌 (Hp)存在與否。
人幽門螺旋桿菌(Hp)Elisa試劑盒(定性)試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
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密封袋 | 1個(gè) | 1個(gè) |
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酶標(biāo)包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
陰性對(duì)照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
陽性對(duì)照 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標(biāo)試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
操作步驟:
- 編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
- 加樣:分別在陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
- 溫育:操作同3。
- 洗滌:操作同5。
- 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
- 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
- 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為幽門螺旋桿菌 (Hp)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為幽門螺旋桿菌 (Hp)陽性
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