牛奶中抗生素的檢測(cè)方法匯總
牛奶中抗生素的檢測(cè)方法匯總
一、 牛奶中抗生素的種類(lèi)
β-內(nèi)酰胺類(lèi):屬于此類(lèi)的抗生素的有青霉素類(lèi)和頭孢霉素類(lèi),常用于奶牛等家畜的個(gè)體臨床治療,殘留在牛乳中。
四環(huán)素類(lèi):常見(jiàn)種類(lèi)有四環(huán)素、金霉素、土霉素、強(qiáng)力霉素等,是一類(lèi)廣譜抗生素。
氨基糖苷類(lèi):常見(jiàn)種類(lèi)有慶大霉素、鏈霉素、二氫鏈霉素、新霉素、壯觀(guān)霉素等,是常用于家畜的氨基糖苷類(lèi)抗生素。
氯霉素類(lèi):包括以下三種化合物:氯霉素,甲砜霉素,氟甲砜霉素。這類(lèi)藥物都是嚴(yán)格限制使用的獸藥,有些國(guó)家禁止使用。
大環(huán)內(nèi)酯類(lèi):常見(jiàn)種類(lèi)有紅霉素、秦樂(lè)霉素、林可霉素、螺旋霉素和鹽霉素等。
磺胺類(lèi):常見(jiàn)種類(lèi)有磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲嘧啶、磺胺嘧啶等,甲氧芐啶是磺胺增效劑,不單獨(dú)使用。
二、抗生素殘留的危害
抗生素的殘留對(duì)人體的健康、生態(tài)平衡、奶制品價(jià)格及奶制品的貿(mào)易均有不同程度的危害。
三、牛奶中抗生素檢測(cè)方法
1.傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)法
微生物檢測(cè)法出現(xiàn)較早,從出現(xiàn)至今,大大改善了我國(guó)抗生素檢測(cè)手段的發(fā)展,其測(cè)定原理是基于抗生素對(duì)微生物的生理機(jī)能、代謝具有一定的抑制效果,與臨床應(yīng)用保持一致,相對(duì)而言,其耗費(fèi)的時(shí)間久,且存在著較大的誤差,目前zui常應(yīng)用的是TTC法、戴爾沃檢測(cè)(Delvotest SP)法、BY法等。
2.通用的檢測(cè)法
相對(duì)而言,其是上應(yīng)用較早的通用測(cè)定方法,也是我國(guó)制定的監(jiān)測(cè)方法,其原理是:如果牛奶中含有抗生素,則加入菌種(嗜熱鏈球菌)經(jīng)培育2.5-3h后,加入TTC指示劑(三苯基四氮唑)不發(fā)生還原反應(yīng),所以樣品呈無(wú)色狀態(tài)。如果牛奶中不含抗生素,則樣品呈紅色。相對(duì)而言,這一方法費(fèi)用較低,但是耗時(shí),因此應(yīng)用不算太廣,發(fā)展受到一定的限制。
3.藍(lán)黃檢測(cè)法
該方法是一種廣譜的微生物抑制法,相對(duì)而言,耗時(shí)短,可以在短時(shí)間內(nèi)檢查出抗生素的殘留情況,只要通過(guò)顏色對(duì)比既可以得出結(jié)論,通過(guò)這一檢測(cè)方法得到的檢測(cè)結(jié)果存在著一定的誤差,容易造成誤檢,但是耗時(shí)短,費(fèi)用低。
4.現(xiàn)代儀器分析法
這一方法主要是借助現(xiàn)代儀器進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定其殘留的抗生素種類(lèi),zui常用的是色譜法、熒光法、毛細(xì)管電泳、色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)等。運(yùn)用不同的理論,采用不同的手段進(jìn)行檢測(cè),提高檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn),加強(qiáng)檢測(cè)的質(zhì)量。相對(duì)而言,該方法分離速度快,,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控制,可以檢測(cè)出抗生素的具體含量,其結(jié)果更加準(zhǔn)確,但待檢樣品需經(jīng)一系列的預(yù)處理,繁瑣費(fèi)時(shí),還必須有相應(yīng)的價(jià)格昂貴的儀器設(shè)備。一般在大型實(shí)驗(yàn)室使用,適合于測(cè)定。
5.生化免疫法
這是近年來(lái)隨著新科技的發(fā)展而逐漸發(fā)展起來(lái)的,其是以抗原與抗體的特異性與可逆性進(jìn)行結(jié)合,是一種分析就技術(shù)?;驹砑揖褪强乖w的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合,可分為酶聯(lián)免疫測(cè)定法(ELISA)、熒光免疫測(cè)定法(FIA)、免疫分析技術(shù)與常規(guī)理化分析技術(shù)聯(lián)用的方法等。幾種方法各有優(yōu)缺點(diǎn),必須注重其綜合使用,提高檢測(cè)的質(zhì)量與準(zhǔn)確度。從其實(shí)踐的結(jié)果來(lái)看,其對(duì)抗生素的殘留現(xiàn)狀檢測(cè)效果良好,靈敏度*,達(dá)到ng級(jí)水平;檢測(cè)快速、專(zhuān)一性強(qiáng)。相對(duì)而言,此法具有高度的專(zhuān)一性,每檢測(cè)一種抗生素就要制備或購(gòu)買(mǎi)相應(yīng)的抗原或抗體,導(dǎo)致檢測(cè)費(fèi)用較高。因此生化免疫檢測(cè)法不可能取代色譜或光譜等常規(guī)分析方法,只能作為其重要的補(bǔ)充。
6.專(zhuān)一試劑盒法
所謂的專(zhuān)一試劑盒法就是根據(jù)含有芽孢桿菌的瓊脂培養(yǎng)基和PH指示劑在一定的溫度下進(jìn)行培養(yǎng),一般維持在65℃左右,孢子發(fā)育生長(zhǎng),降低培養(yǎng)基pH值,在pH指示劑的作用下,藍(lán)(紫)色變?yōu)榫G-黃色。生鮮牛乳中的抗生素殘留使微生物生長(zhǎng)和酸的產(chǎn)生受到抑制,由于沒(méi)有酸生成,顏色將不會(huì)改變。