特殊樣品的移液技巧及常見(jiàn)故障處理
在大多數(shù)情況下,移液器的移液對(duì)象都是水溶液,但是也難免會(huì)碰到一些特殊的樣品,如高揮發(fā)性的樣品、高粘度的樣品、高密度的樣品或者非常溫的樣品等。如果您需要經(jīng)常轉(zhuǎn)移這些特殊的樣品,還是建議您購(gòu)買(mǎi)外置活塞原理的移液器,雖然耗材成本有點(diǎn)高,但畢竟移液精度有保障;如果您只是偶爾轉(zhuǎn)移特殊樣品,并且財(cái)力有限,那么也請(qǐng)您看看本文,會(huì)對(duì)您盡量的提高移液精度有幫助(也只能說(shuō)是有幫助,畢竟比專(zhuān)門(mén)的外置活塞式移液器差點(diǎn))。
1移取揮發(fā)性樣品
要注意兩點(diǎn):一,在移液前務(wù)必潤(rùn)洗兩次;二,在吸液完成后要盡快排液。
2移取高粘度樣品
采用反向移液的模式:在吸液時(shí)把吸/排液按鈕按到第二檔(第二停止點(diǎn)),而在排液時(shí)把按鈕按到*檔(*停止點(diǎn))。另外,在吸液和排液時(shí)均需要3-5秒的停留時(shí)間。
3移取高密度/低密度樣品
移液器的精度數(shù)值都是基于轉(zhuǎn)移純水,如果樣品的密度與水的密度相差很大,那么精度也會(huì)相應(yīng)的差很多。因此,在移液前需要先搞清楚樣品的密度,然后把量程調(diào)節(jié)成待轉(zhuǎn)移樣品體積與密度的乘積。舉例而言,如果一個(gè)樣品的密度是1.2g/cm3,您需要轉(zhuǎn)移300ul,那您應(yīng)該把量程設(shè)置為360ul。這只是粗略的調(diào)整方法,嚴(yán)格的調(diào)整方法還需要借助量器或天平作為輔助工具進(jìn)行準(zhǔn)確的計(jì)算。
4移取高溫/低溫樣品
在移取高溫/低溫樣品時(shí)需要注意三點(diǎn):*,在移液前不可以潤(rùn)洗吸頭;第二,每次移液都要換一個(gè)新吸頭;第三,吸液和排液都要盡快完成。
移液器的故障處理方法
不論使用任何儀器都會(huì)出現(xiàn)一些故障,下面將為大家分析移液器出現(xiàn)故障的原因以及處理的方法:
一、移液器吸液嘴內(nèi)有殘液:出現(xiàn)這種情況是由于吸液嘴不合適,應(yīng)立即更換移液器原配吸液嘴。
二、移液器堵塞,吸液量太少:出現(xiàn)這種情況是由于液體已滲進(jìn)移液器其,應(yīng)清潔并潤(rùn)滑活塞和吸液嘴連件。
三、超出限定的范圍:出現(xiàn)這種情況是由于移液器被損壞了,應(yīng)送維修點(diǎn)修理。
四、移液器吸液嘴推出器卡死或工作不正常:出現(xiàn)這種情況是由于吸液嘴連件污染,應(yīng)卸下推出器套管,用75%乙醇清潔。
五、移液器滲漏或者移液量太少
出現(xiàn)這種情況有以下幾種原因:
1.活塞和 O-形環(huán)潤(rùn)滑不充分.
2.移液器被污染.
3.移液器吸液嘴和連件間有異物.
4.移液器吸液嘴不合適.
5.移液器吸液嘴安裝不當(dāng).
6.移液器吸液嘴塑料濕潤(rùn)不均勻。
出現(xiàn)以上問(wèn)題應(yīng):
1.加適量硅油.
2.清潔并潤(rùn)滑活塞和吸液嘴連件
3.清潔吸液嘴連件,裝上新吸液嘴
4.使用原配吸液嘴
5.重新裝緊
6.裝上新吸液嘴。
移液器如何進(jìn)行消毒滅菌處理
移液器雖小,但是作為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)儀器之一,對(duì)我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和性還是起著不小的作用,因此為了提高我們的實(shí)驗(yàn)效果,本文要說(shuō)說(shuō)移液器的消毒滅菌處理。對(duì)于移液器而言,移液器的消毒和滅菌這兩個(gè)概念經(jīng)常被大家混為一談。而事實(shí)上,兩者是有一定區(qū)別的:消毒只是要求使移液器上的活菌控制在一定范圍內(nèi),達(dá)到無(wú)害化水平即可;而滅菌則更嚴(yán)格些,要求消滅所有活菌。因此,滅菌的處理要求要高于消毒。
移液器消毒有兩種方法:
1.化學(xué)消毒。簡(jiǎn)單說(shuō)來(lái),就是用酒精等擦拭移液器的外表面,然后晾干即可。這對(duì)于所有移液器品牌而言應(yīng)該是都可以做到的;如果說(shuō)有某種移液器無(wú)法用化學(xué)消毒這種方法來(lái)進(jìn)行消毒的話,只能證明其外殼的材質(zhì)非常之差。
2.紫外線消毒。就是用紫外線照射移液器的表面,通過(guò)破壞細(xì)胞的DNA結(jié)構(gòu)來(lái)達(dá)到消毒的目的。紫外線消毒的時(shí)間取決于輻射強(qiáng)度和細(xì)菌對(duì)紫外線的抵抗力強(qiáng)弱。大多數(shù)品牌的移液器是可以用紫外線消毒的,但仍需要事先與供應(yīng)商進(jìn)行確認(rèn),并非所有的移液器都能進(jìn)行紫外線消毒。
移液器使用小常識(shí)
1.使用合適的吸頭:為確保更好的準(zhǔn)確性和精度,建議移液量在吸頭的35%-100%量程范圍內(nèi)。
2.吸頭的安裝:對(duì)于大多數(shù)品牌的移液器,特別是多道移液器,安裝吸頭并非易事:為追求良好的密封性,需要將移液套柄插入吸頭后,左右轉(zhuǎn)動(dòng)或前后搖動(dòng)用力上緊。也有人會(huì)用移液器反復(fù)撞擊吸頭來(lái)上緊,但這樣操作會(huì)導(dǎo)致吸頭變形而影響精度,嚴(yán)重的則會(huì)損壞移液器,所以應(yīng)當(dāng)避免出現(xiàn)這樣的操作。
3.吸頭浸入角度和深度:吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),保持豎直為佳,吸頭浸入深度建議如下所示:
移液器規(guī)格 吸頭浸入深度
2µL和10µL 1 mm
20µL和100µL 2-3 mm
200µL和1000µL 3-6 mm
5000 µL和10mL 6-10 mm
4.吸頭潤(rùn)洗:對(duì)常溫樣品,吸頭潤(rùn)洗有助于提高準(zhǔn)確性;但是對(duì)于高溫或低溫樣品,吸頭潤(rùn)洗反而降低操作準(zhǔn)確性,請(qǐng)使用者特別注意。
5.吸液速度:移液操作應(yīng)保持平順、合適的吸液速度;過(guò)快的吸液速度容易造成樣品進(jìn)入套柄,帶來(lái)活塞和密封圈的損傷以及樣品的交叉污染。
6.移液器使用建議
1)移液時(shí)保持正確的姿勢(shì);不要時(shí)刻緊握移液器,使用帶指鉤的移液器幫助緩解手部疲勞;有可能的話經(jīng)常換手操作。
2)定期檢查移液器的密封狀況,一旦發(fā)現(xiàn)密封老化或出現(xiàn)漏液,須及時(shí)更換密封圈。
3)每年對(duì)移液器進(jìn)行1-2次校正(視使用頻率而定)。
4)絕大多數(shù)移液器,在使用前和使用一段時(shí)間后,要給活塞涂上一層潤(rùn)滑油以保持密封性;而對(duì)于常規(guī)量程的移液器,不涂潤(rùn)滑油也同樣擁有理想的密封性。
Eppendorf移液器具備彈性吸嘴及密度可調(diào)節(jié)功能:彈性吸嘴可使移液槍和吸嘴間的密封性更好,上槍頭的時(shí)候更方便;針對(duì)于移取不同的密度的液體可調(diào)節(jié)密度調(diào)節(jié)器,減少移液過(guò)程中產(chǎn)生的誤差。