黃曲霉毒素B1速測
黃曲霉毒素 B1(Aflatoxin B1 簡寫為 AFB1)是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃曲霉毒素 B1 對人和若干動物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。國家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉毒素 B1 是大部分食品的必檢項目之一。本品的檢測靈敏度為 5ng/ml(5ppb)。
黃曲霉毒素B1速測【檢 測 原 理】
本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),通過單克隆抗體競爭結(jié)合 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和樣品中可能含有的 AFB1 的原理。試劑含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的 AFB1-BSA 偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗 AFB1 單克隆抗體。
黃曲霉毒素B1速測【樣 品 制 備】
1. 谷物:任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 2.0ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再根據(jù)樣
品的種類按以下規(guī)定的稀釋液量,用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。考慮不同樣品對黃曲霉毒素 B1 的zui高含量要求,請參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體:
2. 飼料(以黃曲霉素B1檢測殘留* 50ppb 計算):任取 5g 以上有代表性樣品并粉碎過 20 目篩,準(zhǔn)確稱取 2.0g 均勻粉碎試樣于配套離心管中,再準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水和 4.0ml 乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,4000rpm 離心 1min 得上清液,將上清液用吸管移出 0.5ml 到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干上清液,再以 2ml 的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,*溶解杯底所有的固體,此溶解液為樣品提取液即檢測液。如果黃曲霉素B1檢測殘留*是 30ppb,則用 1.2ml 的稀釋液溶解;如果殘留*是 40ppb,則用 1.6ml 的稀釋液溶解。
3. 食用油:稱 2.0g 油樣于小燒杯中,用 8ml 正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,準(zhǔn)確加入 4ml 純凈水充分振蕩 3min,吸去上層正乙烷層,再加入4ml 的乙酸乙酯,將瓶塞蓋緊密封,充分振蕩 5min,靜置或 3000rpm 離心得上清液,將上清液用吸管移出 2ml 到小玻璃杯中,用電吹風(fēng)吹干,再用稀釋液溶解后為樣品提取液。
4. 醬油、醋、發(fā)酵酒:稱取 25.0g 樣品于小燒杯中,用 5ml 蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,加入 20ml 三氯甲烷,加塞輕輕振搖 3min,靜置分層。放出下層三氯甲烷層,經(jīng)盛有約 5g 預(yù)先用三氯甲烷濕潤的無水 Na2SO4 過濾器于蒸發(fā)皿中,zui后用少量三氯甲烷洗滌過濾器,洗液并于蒸發(fā)皿中,用電吹風(fēng)吹干。吹干冷卻后,準(zhǔn)確加入稀釋液,將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解。
【黃曲霉素B1檢測步驟】
1. 在進(jìn)行黃曲霉素B1檢測前先完整閱讀使用說明書,使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫;
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,打開后平放在桌面上,請在 1 小時內(nèi)盡快使用;
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,滴加 3 滴于加樣孔中,加樣后開始計時;
4. 結(jié)果應(yīng)在 10min 內(nèi)讀取,超過 12min 的時間判讀無效。
【黃曲霉素B1檢測結(jié)果判定】
1. 陽性:位置 C 顯示出紅色線條,而位置 T 不顯色時,或者位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 顯示顏色非常模糊時,判為陽性。陽性結(jié)果表明:AFB1 含量超過樣品允許量。
2. 陰性:位置 C 顯示出紅色線條,位置 T 同時顯示出紅色線條,且 T 線顏色接近 C 線或者深于 C 線時,判為陰性。陰性結(jié)果表明:AFB1 含量低于樣品允許量。
3. 無效:位置 C 不顯示出紅色線條,而位置 T 顯示出紅色線條,該試紙卡視為無效。建議使用新的試紙卡按本說明書要求重新測試。
黃曲霉毒素B1速測【黃曲霉素B1檢測注意事項】
1. 請按照操作步驟進(jìn)行黃曲霉素B1檢測,操作時請勿觸摸試紙顯示區(qū)。
2. 如購買時發(fā)現(xiàn)過期,破損,污染,無效的產(chǎn)品,請到購買處進(jìn)行更換。
3. 黃曲霉素B1檢測試紙卡為一次性產(chǎn)品,請勿重復(fù)使用。
4. 如遇稀釋液不足,請用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用。
5. 本品為篩選試劑,任何陽性結(jié)果請用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn)。
6. 有條件的實驗室可以用 AFB1 標(biāo)準(zhǔn)品測試后作為判斷參考。
【儲藏條件與有效期】
本品應(yīng)保存在干燥陰涼處(4--30℃),有效期 18 個月。