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【精子DNA碎片染色試劑盒（SCD染色法）品    名】

精子五聯(lián)檢：精子DNA碎片染色試劑盒（SCD染色法）

【生殖醫(yī)學(xué)】

人類精子DNA的完整程度對于在卵細胞中傳遞男性基因組起著關(guān)鍵作用。因此，精子DNA碎裂、畸變或者精子染色質(zhì)不穩(wěn)定，均可導(dǎo)致胚胎發(fā)育異?；蛘呓K止，是造成女性流產(chǎn)的zui常見男方因素。有研究證實，約有15%左右的男性不育者精液常規(guī)分析是正常的，但發(fā)現(xiàn)不育者中有近20%的患者有高比率的精子NDA損傷，精子DNA損傷將會影響精子的受精能力、受精卵的分裂以及胚胎發(fā)育，是導(dǎo)致不育的一個重要因素。

【預(yù)期用途】

主要用于成年男性精子DNA完整程度的檢測，分析男性不育及引起女性流產(chǎn)、死胎、畸形等胚胎發(fā)育異常的原因。

【試劑特點】無須特殊儀器，簡單、快速、準(zhǔn)確。

【檢驗原理】

將待測精液標(biāo)本混勻于凝膠中，通過酸變性使精子頭部完整的雙鏈DNA變性為單鏈DNA，DNA完整的精子在經(jīng)過變性和去核蛋白后經(jīng)染色可擴散形成特征性的光暈，而DNA不完整的精子不會產(chǎn)生這種特征性的光暈。醫(yī)生根據(jù)顯微鏡觀察光暈的有無和大小判斷精子的DNA完整程度。DNA完整程度指標(biāo)可作為不育、反復(fù)流產(chǎn)以及胚胎異常病因?qū)W診斷的一種可靠的精子質(zhì)量評價參照指標(biāo)。

【組成成份】

【樣本要求】液化后的新鮮精液或貯存于-20℃的精液標(biāo)本。

【操作方法】

1、將易熔凝膠管置80 ℃孵育20min，待*溶化后，將易熔凝膠管轉(zhuǎn)移至37 ℃恒溫水浴箱中孵育備用。（將80 ℃轉(zhuǎn)移到37 ℃需至少平衡5min方可使用）

2、取100ul液化精液標(biāo)本與200—300ul稀釋液充分混勻，再從中取50ul處理過的精液加入易熔凝膠管中充分混勻，置37 ℃孵育備用。

3、吸取30ul上述配置的精子凝膠混合液，滴在包被載玻片上，立即蓋上蓋玻片，在4 ℃下放置5 min。

4、以“側(cè)抽”的方式小心移除蓋玻片，在室溫條件下滴加1—2ml變性液變性7 min后，棄去變性液。滴加1—2ml裂解液反應(yīng)20min。

5、載玻片水平放置于純化水中3—5 min，其間換水1—2次。

6、將載玻片分別置于70%、90%和100%的乙醇中脫水2 min，取出，空氣自然干燥。

7、加入染色液A 10滴，放置1-2min，再緩慢加染色液B 20滴，以吸耳球吹打混勻染液，染色15min后，用流水緩緩沖洗，自然干燥或吹干，在普通光鏡下觀察結(jié)果。

注意：所有操作過程中，均要求載玻片處于水平狀態(tài)。

【染色結(jié)果】

DNA完整無碎片的精子形成大和中光暈；DNA斷裂為碎片的精子形成小和無光暈；DNA不完整的精子不會產(chǎn)生光暈。

見下圖：圖①為精子DNA碎片判定標(biāo)準(zhǔn)，其中A為精子頭部zui小直徑，B為單側(cè)光暈厚度，當(dāng)B≤A（即光暈太小或無光暈）則表明精子存在DNA碎片。②③為DNA完整的精子，④⑤為存在DNA碎片的精子。

    鏡檢結(jié)果：

【參考值】精子DNA完整率（%）＞75%或精子DNA碎片率（%）＜25%

【注意事項】

1、操作過程對實驗條件要求較高，各個環(huán)節(jié)需準(zhǔn)確控制。

2、檢測樣本為液化后的新鮮精液或貯存于-20℃的精液標(biāo)本，過期或未按貯存要求存放的標(biāo)本不能用于檢測。

3、精液中圓形的各類細胞經(jīng)過變性后，形態(tài)變化較大，須注意與精子相鑒別，不要將其計入精子之列。

4、每次試劑使用后，請迅速蓋好密封保存，以免揮發(fā)及影響效果。

5、使用前應(yīng)詳細閱讀使用說明書及產(chǎn)品包裝標(biāo)識，在有效期內(nèi)使用，并做好個人衛(wèi)生防護，若變性液與裂解液不慎與皮膚接觸或濺入眼睛，立即用大量清水沖洗并及時診治。

6、生產(chǎn)批號、有效期見外包裝。

7、染色廢液、廢瓶或使用后標(biāo)本按醫(yī)療廢棄物處理。

【基本信息】

產(chǎn)品注冊證號：閩明食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2013第1400018號

執(zhí)行產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)：YZB/閩明0030-2013

醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)許可證號：閩食藥管械生產(chǎn)許第20110297號

規(guī)  格：10人份/盒、20人份/盒、40人份/盒

存儲條件及有效期：試劑盒于2-8℃避光保存，有效期12個月。

【附錄】

影響精子受精或男性不育的因素

1.精子死亡率過高

2.精子畸形率過高

3.精子成熟率過低

4.精子染色體異常

5.精子數(shù)量過少

6.精子活動力過低

7.精子液化能力過低

三明市和眾生物技術(shù)有限公司——生殖醫(yī)學(xué)檢測試劑盒系列

1、精子DNA檢測試劑盒

2、精子DNA碎片檢測試劑盒

3、精子活性檢測試劑盒

4、精子形態(tài)學(xué)檢測試劑盒

5、精子核蛋白檢測試劑盒

五項聯(lián)合檢測，診斷分析精子的受精及生育能力，無須儀器，簡單、快速、準(zhǔn)確，不孕不育科的*診斷方案。公司：www.fjhzsw.com