犬流感病毒檢測(cè)卡CIV
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犬流感病毒檢測(cè)卡CIV
廣州健侖生物科技有限公司
廣州健侖長(zhǎng)期供應(yīng):動(dòng)物、畜牧、食品、藥品、化妝品、水產(chǎn)品、違禁品的快速檢測(cè)試劑盒。
動(dòng)物類(lèi)的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:豬、狗、貓、牛、雞、鴨和鵝的傳染病。
畜牧類(lèi)的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:多種添加劑、瘦肉精添加劑等。
食品類(lèi)的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:添加劑殘留、農(nóng)藥殘留、藥物殘留等。
化妝品的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:重金屬、有害物質(zhì)等。
水產(chǎn)品的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:呋喃類(lèi)藥物殘留、抗生素殘留等。
違禁品的主要檢測(cè)項(xiàng)目包括:MOP/MET/KET/THC/MDMA/COC/BZO/AMP/K2/BAR/TCA/BUP/MTD/PCP/OXY/EDDP
我司還提供其它進(jìn)口或國(guó)產(chǎn)試劑盒:包括傳染病系列、免疫組化系列、診斷血清等產(chǎn)品。
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【犬流感病毒檢測(cè)卡CIV】
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4. 效價(jià)測(cè)定
(1)層析法分離純化,HPLC 法測(cè)定效價(jià)(任超,馬珦玻.阿維菌素B1a組分高產(chǎn)菌株誘變育種。生物技術(shù)通報(bào),2005,4)
取發(fā)酵液5 ml,3 000 r/min,離心10 min,棄上清。加入丙酮2 ml,在旋渦式混合器上振蕩1 min,靜置10 min,重復(fù)3次。加入乙酸乙酯3 ml,振蕩1 min,3 000 r/min,離心10 min,上清液備用。
吸取4Oμl上清液點(diǎn)樣于GF254硅膠板上,然后層析。展層劑為:乙酸乙酯:流感:二氯甲烷:無(wú)水:甲醇=9:9:2:1。層析后在紫外燈下觀察,將斑點(diǎn)處硅膠刮入離心管中,加入2 ml無(wú)水甲醇,在旋渦式混合器上振蕩1 min,靜置10 min后3 000 r/min,離心10 min。
HPLC分析采用C18反向柱,流動(dòng)相為無(wú)水甲醇:水=85:15,流速1 ml/min,檢測(cè)波長(zhǎng)244.6 nm。準(zhǔn)確吸取5.0μl樣品濾液進(jìn)樣,根據(jù)各組分的峰面積,對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其含量,各組分之和即為總發(fā)酵單位。
(2)紫外分光光度法(對(duì)于斜面培養(yǎng)物)( 于秀蓮,何建勇,白秀峰. 阿維菌素產(chǎn)生菌的誘變育種. 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào), 第21卷第3期)
將適量的斜面培養(yǎng)物鏟出置于離心管中,加入丙酮2 mL,浸泡后再加入乙酸乙酯2 mI ,在旋渦式混合器上震蕩2 min,3 000 r/min離心10 min,所得萃取液在754紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)244 nm下,以甲醇為對(duì)照,測(cè)定樣品的光密度,根據(jù)預(yù)先制備的光密度一阿維菌素標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算阿維菌素的效價(jià)。
(3)HPLC 法(同上)
色譜柱為kromasil Cl8(200 mm×4.6 ram),流動(dòng)相為甲醇-水(80:20),流速1 mL/min。
取發(fā)酵液7 mL于離心管中。3 000 r/min離心10 min,棄去上清液。加入丙酮2 mL。在旋渦式混合器上震蕩2 min,靜置10 min,再加入乙酸乙酯5 mL,震蕩2 min,再以3 000 r/min離心10 min,得萃取液,用0.45 m的微孔濾膜過(guò)濾,準(zhǔn)確吸取5.0 μl樣品濾液進(jìn)樣,根據(jù)峰面積值進(jìn)行計(jì)算
5.菌絲量(細(xì)胞干重),pH值
6.糖耗
總糖的測(cè)量:采用苯酚-硫酸比色法,以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品。
殘?zhí)呛浚翰捎?、5一二硝基水楊酸比色法。
7.電鏡、細(xì)胞膜通透性
8.活性氧(ROS)
9.質(zhì)譜對(duì)比分析代謝物組變化
4.力価の決定
(1)クロマトグラフィーによる分離および精製、HPLCによる突然変異誘発(突然変異誘発、突然変異誘発、アベルメクチンB1a高収量株突然変異誘発、Biotechnology Bulletin、2005,4)
発酵ブロスを5ml、3000r /分で取り出し、10分間遠(yuǎn)心分離し、上清を捨てた。アセトン2mlを加え、ボルテックスミキサーで1分間振とうし、10分間放置し、3回繰り返す。酢酸エチル3mlを加え、1分間振盪し、3000r /分で遠(yuǎn)心分離し、上清を捨てる。
GF254シリカゲルプレート上に40μlの上清スポットを描き、次いでクロマトグラフィーにかける。プレコート剤:酢酸エチル:インフルエンザ:ジクロロメタン:無(wú)水:メタノール= 9:9:2:1。シリカゲル掻き取り遠(yuǎn)心チューブのスポットである紫外光下でクロマトグラフィーを観察し、2mLの無(wú)水メタノールを添加し、ボルテックスミキサーで1分間、3000r /分後に10分間放置し、10分間遠(yuǎn)心分離した。
C18逆相カラム、移動(dòng)相無(wú)水メタノール:水= 85:15、流速1ml /分、検出波長(zhǎng)244.6nmを用いるHPLC分析。正確に各成分のピーク面積、コントロールの內(nèi)容を計(jì)算するための標(biāo)準(zhǔn)曲線によると、5.0μlサンプルのろ液の注入を描畫(huà)し、各成分の合計(jì)は総発酵単位です。
(2)(スラント培養(yǎng)用)UV分光光度法を(Xiulian、河間市龍、白Xiufengである。突然変異は瀋陽(yáng)醫(yī)薬大學(xué)の歪みを生成アベルメクチン繁殖、第21巻、第3號(hào))
適切な量??の斜面培養(yǎng)シャベルを遠(yuǎn)心管に入れ、浸漬後にアセトン2mLを添加し、次いで酢酸エチル2mL、ボルテックスミキサー2分間、3000r /分の遠(yuǎn)心分離10分を加え、抽出対照としてメタノールを用いて754 UV分光光度計(jì)波長(zhǎng)244nmで液體、アバメクチン効力を計(jì)算するためのアベルメクチン標(biāo)準(zhǔn)曲線の予め調(diào)製された光學(xué)密度に従ってサンプルの光學(xué)密度の測(cè)定。
(3)HPLC法(上記と同じ)
カラムはクロマシルCl8(200mm×4.6ラム)であり、移動(dòng)相はメタノール - 水(80:20)であり、流速は1mL /分であった。
遠(yuǎn)心管內(nèi)で発酵ブロス7 mLを採(cǎi)取する。 3000r /分の遠(yuǎn)心分離10分後、上清を捨てた。 2mLのアセトンを加える。ボルテックスミキサーで2分間振とうし、10分間靜置した後、5mLの酢酸エチルを加え、2分間振とうし、3000r / minで10分間遠(yuǎn)心分離した後、抽出物を0.45μmのミクロ孔で抽出したフィルター膜、正確な描畫(huà)ピーク面積値に従って計(jì)算した5.0μlサンプルろ液注入
5。菌糸體量(細(xì)胞の乾燥重量)、pH値
6。砂糖消費(fèi)量
トータルシュガー測(cè)定:グルコースを標(biāo)準(zhǔn)としたフェノール硫酸比色法。
殘留糖含量:3,5-ジニトロサリチル酸比色法。
7。電子顕微鏡、細(xì)胞膜透過(guò)性
8。反応性酸素種(ROS)
9。メタボローム変化の比較分析
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