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免疫共沉淀(CHIRP)實驗

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更新時間:2024-08-30 15:53:25瀏覽次數(shù):7408次

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服務(wù)名稱: 免疫共沉淀(CHIRP)實驗
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                                      免疫共沉淀(CHIRP)實驗

 

RNA綁定的DNA和蛋白相互作用: CHIRP

免疫共沉淀實驗(Chromatin Isolation by RNA Purification, CHIRP)是-種檢測體內(nèi)與RNA綁定的DNA和蛋白相互作用的方法,可同時分析IncRNAcircRNA、蛋白及DNA三者互作關(guān)系。

 

CHIRP實驗意義

IncRNA可與蛋白質(zhì)、DNA和RNA相互作用,實現(xiàn)多樣化功能,CHIRP可以探討IncRNA與其互作的DNA.蛋白質(zhì)的功能與作用機制,是相關(guān)科學研究工作的有力工具。IncRNA的研究在表觀遺傳調(diào)控等生命活動中發(fā)揮重要作用,CHIRP是研究

IncRNA的重要技術(shù)手段,可在全基因組范圍內(nèi)鑒定RNA與染色質(zhì)的互作,并對其進行定性、定量及定位的分析。

 

CHIRP實驗原理

CHIRP (Chromatin Isolation by RNA )是通過結(jié)合生物素的核酸探針,將目標RNA拉下來,與之共同作用的DNA染色體片段(DNA與蛋白質(zhì)復(fù)合體)就會被吸附下來,后可以通過qRT-PCR. WB.測序分析和質(zhì)譜分析等檢測RNA. DNA和蛋白質(zhì)。

 

CHIRP的實驗流程

①探針設(shè)計:設(shè)計反義穿核苷酸探針:

②細胞培養(yǎng)

③破碎細胞

④生物素標記的DNA探針與RNA雜交

⑤CHIRP

⑥RNA、DNA及核酸結(jié)合蛋白提取; 

⑦分析檢測。

 

結(jié)果展示

 

 

 

 

 

 

 

 

 

實驗完成周期及交付標準

1.實驗周期: 1-3個月

2.交付標準: CHIRP鑒定結(jié)果報告、分析報告、實驗報告(試劑、 耗材、實驗步驟)、原始數(shù)據(jù)等

 

實驗需與客戶確認的信息

1.目的基因與蛋白信息。

2.樣本類型與種屬

3.是否需要生信分析

 

參考文獻

[1]lyer S , Modali S D , Agarwal S K. The Long Non-Coding RNA MEG3 is an Epigenetic Determinant of Oncogenic

Signaling in Functional Pancreatic Neuroendocrine Tumor Cells[J]. Molecular and Cellular Biology, 2017:MCB.00278-

17.

[2] Chu C , Chang H Y . Understanding RNA-Chromatin Interactions Using Chromatin Isolation by RNA Purification

(ChIRP).[J]. Methods in Molecular Biology, 2016, 1480.

[3]ZhuJJ,FuHJ , Wu Y G , et al. Function of IncRNAs and approaches to IncRNA-protein interactions[J]. Science

China Life Sciences, 2013, 56(10):876-885.

 

實驗代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標定量(Label-free)實驗

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