目錄:北京索萊寶科技有限公司>>生化檢測試劑盒-微量法>> BC3325-100T/48S葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）檢測試劑盒 微量法
| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/48S |
| 貨號 | BC3325 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),綜合 |
| 主要用途 | 葡萄糖-6-磷酸酶（G6P)檢測 |
葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）活性檢測試劑盒說明書
微量法
貨號: BC3325
規(guī)格: 100T/48S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
| 試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| 提取液 | 液體60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑一 | 液體12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑二 | 粉劑×2瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑三 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑四 | 粉劑×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 試劑五 | 液體4 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品 | 液體1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
試劑三：臨用前用4 mL蒸餾水溶解備用。
試劑四：臨用前用4 mL蒸餾水溶解備用。
標準品：10 μmol/mL磷標準液。臨用前用蒸餾水稀釋16倍至0.625 μmol/mL的標準溶液備用。
工作液的配制：試劑二中加入5 mL試劑一充分溶解備用?？梢詫⒐ぷ饕悍盅b后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融。
定磷試劑的配制：按H2O:試劑三:試劑四:試劑五（V:V:V:V）=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無色則試劑失效，若是藍色則為磷污染，定磷劑現(xiàn)用現(xiàn)配。
注意：配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
產(chǎn)品說明：
葡萄糖-6-磷酸酶（(glucose 6 phosphatase，G6Pase，EC 3.1.3.9）是一種水解磷酸化合物的磷酸酶，廣泛存在于動物、植物、微生物和細胞中，是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶，在保證血糖的動態(tài)平衡方面起著重要的作用。
G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和無機磷，利用鉬藍法測定無機磷含量的增加，即可反映G6P活性。
注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、低溫臺式離心機、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件
注意事項：
建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定，并在計算公式中乘以稀釋倍數(shù)。
若A大于1.5或者顯色完成后有沉淀產(chǎn)生，將上清液或者粗酶液用蒸餾水稀釋后再進行測定。
定磷試劑應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，正常顏色為淺黃色，如有變色或變藍則均為失效。
實驗實例：
取0.1g稗草加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測得A測定管=0.254、A對照管=0.171、A空白管=0.047、A標準管=0.357，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.254-0.171=0.083，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.357-0.047=0.31，按樣本質(zhì)量計算酶活得：G6P（U/g 質(zhì)量）=312.5×ΔA÷ΔA標準÷W=312.5×0.083÷0.31÷0.1=836.6935 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠肝臟加入1mL提取液進行勻漿研磨，取上清后按照測定步驟操作，用96孔板測得A測定管=0.995、A對照管=0.384、A空白管=0.047、A標準管=0.357，計算△A=A測定管-A對照管=0.995-0.384=0.611，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.357-0.047=0.31，按樣本質(zhì)量計算酶活得：G6P（U/g 質(zhì)量）=312.5×ΔA÷ΔA標準÷W=312.5×0.611÷0.31÷0.1=6159.274 U/g 質(zhì)量。
取0.1g小鼠血清稀釋2倍，直接檢測，用96孔板測得A測定管=0.38、A對照管=0.199、A空白管=0.047、A標準管=0.357，計算ΔA=A測定管-A對照管=0.38-0.199=0.181，ΔA標準=A標準管-A空白管=0.357-0.047=0.31，按血清計算酶活得：G6P（U/mL）=312.5×ΔA÷ΔA標準×稀釋倍數(shù)=312.5×0.181÷0.31×2=364.9194 U/mL。
相關(guān)發(fā)表文獻：
Fan X, Hou T, Jia J, et al. Discrepant dose responses of bisphenol A on oxidative stress and DNA methylation in grass carp ovary cells[J]. Chemosphere, 2020, 248: 126110.
相關(guān)系列產(chǎn)品：
BC0730/BC0735 丙 酮酸羧化酶（PC）活性檢測試劑盒
BC0920/BC0925 果糖-1,6-二磷酸（酯）酶（FBP）活性檢測試劑盒
葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）檢測試劑盒 微量法 葡萄糖-6-磷酸酶（G6P）檢測試劑盒 微量法
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