諾如病毒快速檢測卡

諾如病毒感染性腹瀉是由諾如病毒屬病毒引起的腹瀉，具有發(fā)病急、傳播速度快、涉及范圍廣等特點，是引起非細菌性腹瀉暴發(fā)的主要病因。諾如病毒感染性強，以腸道傳播為主，可通過污染的水源、食物、物品、空氣等傳播，常在社區(qū)、學(xué)校、餐館、醫(yī)院、托兒所、孤老院及*等處引起集體暴發(fā)。

諾如病毒感染性腹瀉在*范圍內(nèi)均有流行，全年均可發(fā)生感染，感染對象主要是成人和學(xué)齡兒童，寒冷季節(jié)呈現(xiàn)高發(fā)。在發(fā)展中國家，諾如病毒感染性腹瀉普遍存在，也常引起暴發(fā)流行。在我國5歲以下腹瀉兒童中，諾如病毒檢出率為15%左右，血清抗體水平調(diào)查表明我國人群中諾如病毒的感染亦十分普遍。

用于人類糞便中的諾如（諾瓦克）病毒檢測，用于腸胃病暴發(fā)時的快速檢測。采用IDEIA酶免技術(shù)。

1.用途

用于體外診斷。 諾如病毒快速檢測試劑卡（免疫層析法）是用免疫層析的方法快速定性測定人糞便樣本中，基因1型（GG1）和基因2型（GG2）的諾如病毒。該試劑可以協(xié)助診斷胃腸炎，分析有疑似諾如病毒胃腸炎癥狀的兒童和成人的糞便樣本。

2.檢測摘要與說明

諾如病毒是一個引起世界性感染的胃腸炎的主要原因，估計美國每年約有23，000，000的病例（1，2）。該病毒經(jīng)常在公共場所中爆發(fā)，如育嬰室、醫(yī)院、托兒所、*和油輪（3，4，5）。諾如病毒爆發(fā)的報導(dǎo)比細菌性致病原所致爆發(fā)的報道要更常見，說明諾如病毒對公共健康有很相當(dāng)?shù)挠绊懀?/span>6）。

諾如病毒快速檢測試劑卡（免疫層析法），應(yīng)用單克隆抗體，快速、可靠地檢測糞便標本中的抗原，從而使病人能夠盡快開始治療。這種快速檢測可以直接地、敏銳地同時檢測諾如病毒基因1型和基因2型抗原。尤其適合檢測樣本數(shù)量少的樣本。

3.檢測原理

諾如病毒快速檢測試劑卡（免疫層析法）為快速、多步法側(cè)流免疫層析檢測，應(yīng)用了抗諾如病毒抗原的單克隆抗體。在加樣孔旁的反應(yīng)窗內(nèi)，有兩條包被了固定抗體的平行線。檢測線（T）包含了抗諾如病毒抗原的抗體。質(zhì)控線C包含了抗鼠IgG的抗體。酶標記物1包含了生物素化的抗諾如病毒抗原的抗體，酶標記物2是由結(jié)合了辣根過氧化物酶的鏈霉菌抗生物素蛋白組成。檢測過程中，先從已經(jīng)準備好的糞便樣本懸濁液中，吸取一定量的上清液，與一定量的酶標記物1混合，加入檢測卡較小的窗口中（加樣孔）。經(jīng)過室溫下10 分鐘的孵育后，樣本和酶標記物混合液被檢測膜吸收后，在過濾片上移動。在這個過程中，諾如病毒陽性標本中的抗原-酶標記物復(fù)合物，與檢測線上固定的抗諾如病毒抗體結(jié)合，沒有結(jié)合抗原的生物素化的抗體則結(jié)合在質(zhì)控線上。之后加入酶標記物2，在室溫下孵育1 分鐘，結(jié)合了過氧化物酶的鏈霉菌抗生物素，與通過特異性抗體而固定在膜上的生物素結(jié)合。

    在反應(yīng)窗加入洗液，洗掉沒有結(jié)合的過氧化物酶。如果測試為諾如病毒陽性，加入底物后三分鐘，在檢測線（T）上就會出現(xiàn)藍線，同時質(zhì)控線（C）上也會出現(xiàn)藍線。如果質(zhì)控線沒有變藍，說明這次檢測的操作存在問題，結(jié)果不可以用于診斷。

4.試劑盒組成

試劑盒內(nèi)的試劑足夠進行20次檢測

測試卡     Cassette      20次檢測   內(nèi)裝20個獨立包裝的測試卡

稀釋緩沖液 Diluent       30 ml 樣本稀釋緩沖液，氯化鈉蛋白緩沖液，即用，含0.1% Kathon CG;開瓶即用，藍色

洗液      Wash          10ml 洗液，磷酸化的氯化鈉，含0.1% Thimerosal，開瓶即用

酶標記物1 Conjugate│1   7ml 穩(wěn)定蛋白溶液中的生物素標記的抗諾如病毒抗體，開瓶即用，藍色

酶標記物2 Conjugate│2   5ml 穩(wěn)定蛋白溶液中的鏈霉菌過氧化物酶，開瓶即用

底物       Substrate    7ml 過氧化氫/TMB，開瓶即用

吸液管     Pipet         25支每包中裝有25支有刻度標記的一次性塑料吸樣管

諾如病毒快速檢測卡