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凝膠色譜法的凝膠種類及性質(zhì)

來源:東曹(上海)生物科技有限公司   2016年05月09日 08:49  
   

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  聚丙烯酰胺凝膠是一種人工合成凝膠,是以丙烯酰胺為單位, 由甲叉雙丙烯酰胺交聯(lián)成的,經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀,控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號的凝膠。交聯(lián)劑越多,孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠-P (Bio-Gel P),由日本tosoh的TSKGEL的pw系列,適合蛋白和多糖的純化。即丙烯酰胺和少量交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺,在催化劑過硫酸銨作用下聚合形成凝膠。

  聚丙烯酰胺(PAM,polyacrylamide)

  聚丙烯酰胺簡稱PAM,分子量100~500萬。聚丙烯酰胺主要有兩種商品形式,一種是粉末狀的,另一種是膠體,還有聚丙烯酰胺乳液 (上海合成樹脂研究所研制) 。易溶于冷水,速度很慢,高分子量的聚丙烯酰胺當濃度超過10%以后.就會形成凝膠狀結(jié)構(gòu)。提高溫度可以稍微促進溶解,但溫度不得超過50℃,以防發(fā)生分子降解。難溶于有機溶劑。溫度超過120 ℃時分解。中性,無毒。用作增稠劑、絮凝劑、減阻劑,具有凝膠、沉降、補強等作用。貯存于陰涼、通風、干燥的庫房內(nèi),防潮、避光、防熱。存放時間不宜過長。

 ?。ǘ┙宦?lián)葡聚糖凝膠(Sephadex)

 ?、?Sephadex G 交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephndex,不同規(guī)格型號的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯數(shù)為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,和G-200。因此,“G”反映凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分部范圍。

 ?、?Sephadex LH-20,是Sephadex G-25的羧丙基衍生物,能溶于水及親脂溶劑,用于分離不溶于水的物質(zhì)。

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  瓊脂糖 Agarose,縮寫為 AG,是瓊脂中不帶電荷的中性組成成份,也譯為瓊膠素或瓊膠糖。瓊膠糖化學結(jié)構(gòu)由β-D-吡喃半乳糖 (1-4) 連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基單位構(gòu)成。

  把瓊脂糖,即幾乎不含硫酸根的主要成分為多糖的瓊脂,溶于熱水,冷卻制成的凝膠。制成的小顆粒用于凝膠過濾。適于用sephadex不能分級分離的大分子的凝膠過濾,若使用5%以下濃度的凝膠,也能夠分級分離細胞顆粒、病毒等。利用其吸附性小的特點,有時用它代替瓊脂、以作為免疫電泳或凝膠內(nèi)沉降反應(yīng)的支持物。

  瓊脂糖凝膠商品名很多,常見的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ),Bio-Gel-A(美國,Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用

  凝膠色譜法(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學滅菌活處理。

  (四)聚苯乙烯凝膠

  商品為Styrogel,具有大網(wǎng)孔結(jié)構(gòu),可用于分離分子量1600到40,000,000的生物大分子,適用于有機多聚物,分子量測定和脂溶性天然物的分級,凝膠機械強度好,洗脫劑可用甲基亞砜。

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