果膠酶活力分析方法探討

果膠酶是指分解果膠質(zhì)的多種酶的總稱, 它可分為內(nèi)切型和外切型兩大類。果膠酶廣泛應(yīng)用于果品的
加工工業(yè)中, 主要作用是果品榨汁時(shí)降低果漿泥的粘稠度, 提高榨汁效率、出汁率、果汁澄清度和穩(wěn)定性等。果膠酶的活力對(duì)果品的加工品質(zhì)影響很大, 因此測(cè)定果膠酶的活力顯得尤為重要。測(cè)定酶活力的方法主要有還原法、色原底物法、粘度法等, 其中還原法中的3,5 一二硝基水楊酸比色法( 簡(jiǎn)稱DNS 法) 具有操作簡(jiǎn)便, 對(duì)試劑、儀器等條件要求不高等優(yōu)點(diǎn)。該方法是利用果膠酶在一定溫度、時(shí)間和條件下水解果膠, 釋放出還原性D- 半乳糖醛酸, 與3,5 一二硝基水楊酸共熱產(chǎn)生棕紅色的氨基化合物, 即發(fā)生顯色反應(yīng)。在一定范圍內(nèi), 水解生成D- 半乳糖醛酸的量與吸光度成正比[1~2], 與果膠酶活力成正比, 通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)定吸光度, 可以計(jì)算出果膠酶的活力。該方法( 又稱分光光度計(jì)法) 簡(jiǎn)單易行, 但操作中影響因素較多, 往往影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。本研究就測(cè)定中各影響因素進(jìn)行了優(yōu)化實(shí)驗(yàn), 試圖提出果膠酶活力測(cè)定的*技術(shù)參數(shù)。

通過(guò)分光光度法測(cè)定果膠酶活力的各影響因素的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn), 測(cè)量波長(zhǎng)、DNS 試劑用量、果膠酶
稀釋倍數(shù)以及果膠用量對(duì)酶活力測(cè)定結(jié)果都有較大的影響。結(jié)果認(rèn)為, 在48℃、pH4.8 的條件下, 適宜的測(cè)定波長(zhǎng)為540nm, DNS 試劑( 3g/L) 的用量為2.5mL, 果膠酶的稀釋倍數(shù)為1000, 果膠( 5g/L) 的用量為1.0mL, 以此為參數(shù)測(cè)得的酶活力較為準(zhǔn)確。

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