食品、制藥、醫(yī)療等行業(yè)微生物實驗室中微生物檢測用的玻璃器皿、金屬用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)物等使用之前必須經過滅菌。一下對滅菌方法進行詳細說明:
一、滅菌前準備
1、所有需經滅菌的物品首先要清洗晾干,玻璃器皿如吸管、平皿用紙包裝嚴密,如用金屬筒應將上面氣孔打開。
2、裝培養(yǎng)基的三角瓶塞好棉塞,用紙包好,試管蓋好蓋,注射器須將管芯抽出,用紗布包好。
二、裝放
1、大型高壓蒸氣滅菌鍋:放置滅菌物品不應超過鍋內容積的80%,物品應放置鍋內擱架上或鐵絲筐中。
2、手提式高壓滅菌鍋:將物品分別包扎好,直接放入消毒筒內,物品之間不能過擠。
三、滅菌器設備檢查
1、檢查門的開關是否靈活,橡皮圈有無損壞,是否平整。
2、壓力表蒸氣排盡時是否停留在零位,關好門和蓋,通蒸氣或加熱后,觀察是否漏氣,壓力表與溫度計所標示的狀況是否吻合,管道有無堵塞。
3、對有自動電子程序控制裝置的滅菌器,使用前應檢查規(guī)定的程序,是否符合于進行滅菌處理的要求。
四、滅菌處理
手提式高壓滅菌鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應按下列步驟進行:
1、手提式高壓鍋在主體內加入3L清水,立式高壓鍋加水16L(重復使用時應將水量補足,水變混濁需要更換)。
2、手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣管插入消毒桶內壁的方管中(無軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不得使用)。
3、蓋好頂蓋擰緊,勿使漏氣;置滅菌器于火源上加熱,立式壓力鍋通上電源,并打開頂蓋上的排氣閥放出冷氣(水沸騰后排氣10~15min)。
4、關閉排氣閥,使蒸氣壓上升到規(guī)定要求,并維持規(guī)定時間(按滅菌物品性質與有關情況而定)。
5、達到規(guī)定時間后,對需干燥的物品,立即打開排氣閥排出蒸汽,待壓力恢復到零時,自然冷卻至60℃后開蓋取物,如為液體物品,不要打開排氣閥,而應立即將鍋去除熱源,待自然冷卻,壓力恢復至零,溫度降到60℃以下再打開蓋取物,以防止突然減壓液體劇烈沸騰活容器爆破。
五、滅菌溫度與時間
壓力蒸氣滅菌鍋滅菌溫度與時間見下表:
物品 | 滅菌時間min | |
115℃ | 121℃ | |
不含糖等耐熱培養(yǎng)基 | 15 | |
含糖類等耐熱培養(yǎng)基 | 15-20 | |
染菌培養(yǎng)物 | 30 | |
器械器皿 | 30 |
六、滅菌處理
滅菌后物品,按正常情況已屬無菌,從滅菌器中取出應仔細檢查,以免再度污染。
1、物品取出,隨即檢查包裝的完整性,若有破壞或棉塞脫掉,不可作為無菌物品使用。
2、取出的物品,如為包裝有明顯的水浸者,不可作為無菌物品使用。
3、培養(yǎng)基或試劑等,應檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態(tài),未達到者應廢棄。
4、取出的物品掉落在地或誤放不潔之處,或沾有水液,均視為受到污染,不可作為無菌物品使用。
5、取出的合格滅菌物品,應存放于貯藏室或防塵柜內,嚴禁與未滅菌物品混放。
6、凡屬合格物品,應標有滅菌日期及有效期限。
7、每批滅菌處理完成后,記錄滅菌品名、數量、溫度、時間、操作者。
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