彩色免疫金銀法的優(yōu)點(diǎn)
基本原理
彩色免疫金銀法(coloured IGSS, CIGSS)是在IGSS基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新方法。其基本原理與彩色顯影相似。IGSS染色方法在抗原位點(diǎn)處生成銀顆粒經(jīng)鐵氰化jia與溴化鉀的作用即被氧化成溴化銀,后者與彩色顯影劑相接觸立即被還原成金屬銀,而彩色顯影劑本身則被氧化,其氧化產(chǎn)物使彩色顯色劑由無色變成有色的染料并沉積在銀顆粒的部位,金屬銀變成了銀離子。由于染料只能通過彩色顯影劑沉積在有銀的部位,所以不與組織發(fā)生非特異性吸附。
CIGSS優(yōu)點(diǎn)
(1)陽性結(jié)果比黑色更鮮明;
(2)可以使弱信號(hào)得到放大;
(3)消除IGSS背景染色;
(4)信號(hào)/背景比值高;
(5)是開展免疫金銀雙標(biāo)技術(shù)的新途徑。光鏡下見HBsAg陽性物質(zhì)呈鮮艷的藍(lán)色(α-萘酚為成色劑)或呈綠色(菲尼酮為成色劑)。背景干凈,陽性結(jié)果清楚。
彩色顯影背景過染的處理方法
彩色免疫金銀法,在膠體金技術(shù)中是一個(gè)很大的突破,它的優(yōu)點(diǎn)是結(jié)果鮮明,對(duì)比度好,但是在彩色顯影過程中時(shí)間過長(zhǎng),背景可有一些著色,彩色顯影的時(shí)間控制很重要。一旦過染可用以下方法處理:
(1)純酒精滴到切片上3~5s,立即沖掉,水洗,充分洗去酒精,如果洗不*,易造成陽性結(jié)果褪色。
(2)75%的酒精滴到切片上1min,立即沖掉,褪色不能時(shí)間過長(zhǎng),過長(zhǎng)后陽性結(jié)果全部褪掉。
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