SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（血紅蛋白的分離試劑盒）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
在本試劑盒中，聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱 Acr)單體和少量交聯(lián)劑甲叉
雙丙烯酰胺(簡(jiǎn)稱 Bis)通過化學(xué)催化劑(過硫酸銨)、四甲基乙二胺(TEMED)作為加速
劑形成三維空間的高聚物。SDS 能夠使蛋白質(zhì)復(fù)合體解離，并能夠去除蛋白質(zhì)所帶
電荷對(duì)其遷移率的影響，從而使蛋白質(zhì)遷移率*反映出單條肽鏈的分子量大小。
蛋白樣品可通過聚丙烯酰胺凝膠電泳，得到分離，并能根據(jù)蛋白質(zhì)條帶的位置確定
其分子量。本試劑盒具有方便，快捷的特點(diǎn)。
試劑盒規(guī)格：
8cm×7cm×1mm 厚的凝膠 3 塊。
試劑盒內(nèi)容：

操作步驟：
1. 打開試劑盒，依照說明書清點(diǎn)各種試劑；
2. 配制 30%的丙烯酰胺混合液：將試劑盒中提供的 Acr 與 Bis 固體混合物加
蒸餾水 10mL，混勻后，在冰箱中 4℃避光保存；
3. 配制 10%SDS：將試劑盒中提供的 SDS 固體加 1mL 蒸餾水；
4. 配制 10%過硫酸銨溶液（現(xiàn)配現(xiàn)用）：將試劑盒中提供的過硫酸銨固體加
蒸餾水 1mL，混勻后，在冰箱中 4℃保存；
5. 配制電泳緩沖液：將試劑盒中提供的 Tris-甘氨酸混合物加蒸餾水至 1500
mL 混勻；
6. 配制脫色液：在 500 mL 蒸餾水中依次加入甲醇 400mL，乙酸 100mL；
7. 配制染色液：將試劑盒中提供的染料固體(考馬斯亮藍(lán) G250)加入 200mL
脫色液中混勻，濾紙過濾；

* 配置好的染色液可反復(fù)使用。
8. 分離膠配置（配制 1 塊膠用量）：在燒杯中依次加入水 1.6mL，30%的丙烯
酰胺混合液 2.0mL，1.5mol/LTris 溶液(pH8.8)1.3mL，10%的 SDS 50μL，10%過硫
酸銨 50μL，TEMED 2μL；
9. 濃縮膠配置（配制 1 塊膠用量）：在燒杯中依次加入水 2.1mL，30%的丙烯
酰胺混合液 0.5mL，1.0mol/LTris 溶液(pH6.8)0.38mL，10%的 SDS 30μL，10%過硫
酸銨 30μL，TEMED 3μL；
10. 樣品制備：10μL 的蛋白樣品與 10μL 的 2×加樣緩沖液混勻后，至于沸水中
5～10 分鐘，加入點(diǎn)樣孔進(jìn)行電泳；
11. 實(shí)驗(yàn)操作詳見人教社生物技術(shù)實(shí)踐（選修一）光盤中的《血紅蛋白的提取和分
離》部分。

儲(chǔ)存條件：
本試劑盒置于 4℃冰箱保存 3 個(gè)月。（注：2×加樣緩沖液需要放在-20℃保存。）