如何選擇適合的熒光培養(yǎng)皿?首先我們來(lái)了解下細(xì)胞培養(yǎng)皿依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?。下面和北京博杰科技公司小編一起去了解下如何選擇適合的熒光培養(yǎng)皿吧!
(1)平底和圓底(U型和V型)熒光培養(yǎng)皿的區(qū)別和選擇
不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致。因此做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí),無(wú)論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測(cè)吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì),標(biāo)示“Tissue Culture (TC) Treated”是養(yǎng)細(xì)胞用的。
U型或V型板,一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí),需要二者相互接觸刺激,這時(shí)一般會(huì)選用U型板,因?yàn)榧?xì)胞會(huì)由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會(huì)用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)”等。V型板常用做細(xì)胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞殺傷這種實(shí)驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)。
(2)Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別
Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計(jì)便于對(duì)晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。
細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長(zhǎng)材料,同時(shí)還有low binding surface
(3)細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別
酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),也可以用來(lái)測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。
(4)常用不同熒光培養(yǎng)皿的孔底面積及推薦加液量
不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過(guò)多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。
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