人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460 提高腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)存活率和生長(zhǎng)率措施
根據(jù)人們的經(jīng)驗(yàn),腫瘤細(xì)胞在體外不易培養(yǎng),建立能傳代的腫瘤細(xì)胞系更為困難。當(dāng)腫
瘤組織或細(xì)胞初代接種培養(yǎng)后,常出現(xiàn)以下幾種情況:
*無(wú)細(xì)胞游出或移動(dòng);
有細(xì)胞移動(dòng)和游出,但無(wú)細(xì)胞增殖,細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代;
有細(xì)胞增殖,傳若干代后停止生長(zhǎng)或衰退死亡;
傳數(shù)代后細(xì)胞增殖緩慢,經(jīng)過(guò)一段停滯期后,才又呈旺盛生長(zhǎng)狀態(tài),形成穩(wěn)定生長(zhǎng)的腫
瘤傳代細(xì)胞系。
以上現(xiàn)象說(shuō)明腫瘤細(xì)胞對(duì)體外生存條件有較高的要求,并需經(jīng)過(guò)對(duì)新環(huán)境的適應(yīng)才能生
長(zhǎng),因此欲獲得好的培養(yǎng)效果,不能局限于一般培養(yǎng)法,必須采用一些特殊的措施。
1.適宜底物:把經(jīng)過(guò)純化的細(xì)胞接種在不同的底物上,如鼠尾膠原底層、飼細(xì)胞層等。
2.生長(zhǎng)因子:應(yīng)用促細(xì)胞生長(zhǎng)因子,向培養(yǎng)液中增加一種或幾種促細(xì)胞生長(zhǎng)因子。根據(jù)細(xì)胞
種類(lèi)不同選用不同的促生長(zhǎng)物,常用有胰島素、 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460細(xì)胞 雌激素以及其它生長(zhǎng)因子。
為提高腫瘤細(xì)胞對(duì)體外培養(yǎng)環(huán)境的適應(yīng)力和增加有活力癌細(xì)胞(干細(xì)胞)的數(shù)量,可采
用動(dòng)物體轉(zhuǎn)嫁接種成瘤后,再?gòu)膭?dòng)物體內(nèi)取出進(jìn)行培養(yǎng),能提高體外培養(yǎng)的成功率。受體動(dòng)
物以裸鼠。
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于:取材、成纖維細(xì)胞的排除、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物
等幾個(gè)方面。在具體培養(yǎng)方法方面,腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)與正常組織細(xì)胞培養(yǎng)并無(wú)原則差別,初代
培養(yǎng)應(yīng)用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。取材:人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460細(xì)胞 人腫瘤細(xì)胞來(lái)自外科手術(shù)或活檢瘤組織。取材部位非常重要,體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區(qū),取材時(shí)盡量避免用退變組織,要挑選活力較好的部位。癌性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是好的培養(yǎng)材料。取材后宜盡快進(jìn)行培養(yǎng),如因故不能立即培養(yǎng),可貯存于4℃中,但不宜栽過(guò)24小時(shí)。
細(xì)胞庫(kù)常用細(xì)胞:
人胚肺成纖維細(xì)胞MRC-5
人胚肺成纖維細(xì)胞CCC-HPF-1
人胚胎氣管組織來(lái)源細(xì)胞CCC-HBE-2
人胚胎肺成纖維細(xì)胞WI-38
SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細(xì)胞WI38/VA13
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS
人胚肺二倍體細(xì)胞KMB-17
人肺細(xì)胞HLF-a
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS 153
人胚肺細(xì)胞 VA13細(xì)胞WI-38 VA13亞系 2RA
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1
人胚肺細(xì)胞系KuMA
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞系A(chǔ)E1201
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H226
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B
人胚肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞SL-1
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H209
人低分化肺腺癌細(xì)胞GLC-82
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H446
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H157
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H520
人肺巨細(xì)胞癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株P(guān)G-BE1
人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株P(guān)G-LH7
人肺癌細(xì)胞A-427
人低分化肺腺癌細(xì)胞SK-LU-1
人肺支氣管癌細(xì)胞NCI-H1650
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H1975
人非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞NCI-H2087
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H2227
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H23
人肺腺鱗癌細(xì)胞NCI-H596
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H838
人肺鱗癌細(xì)胞LTEP-s
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞LTEP-sm
人肺鱗癌瘤株LTEP-s
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H1703
人肺鱗癌細(xì)胞NCI-H2170
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H524
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1
人肺癌細(xì)胞A549
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞H125
人肺癌細(xì)胞H1299
人肺癌細(xì)胞TKB-1
人肺腺癌細(xì)胞LTEP-a-2
人肺腺癌細(xì)胞Lu-165
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H460
人肺腺癌細(xì)胞SPC-A-1
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞095-D
人肺鱗癌細(xì)胞SK-MES-1
人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H661
人肺黏液上皮樣癌細(xì)胞NCI-H292
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6
人肺腺癌細(xì)胞NCI-H1395
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H358
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞HCC827
人典型小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1688
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H1299
人胚肺二倍體細(xì)胞2BS
人支氣管上皮樣細(xì)胞BEAS-2B
人胚肺成纖維細(xì)胞CCC-HPF-1
人胚胎氣管組織來(lái)源細(xì)胞CCC-HBE-2
人肺腺癌細(xì)胞Calu-3
人肺退行性癌細(xì)胞Calu-6
人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞DMS 153
人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞95-D
人低分化肺腺癌細(xì)胞GLC-82
人肺細(xì)胞HLF-a
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-1
人胚肺二倍體細(xì)胞HEL-2
腫瘤細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基的要求不如正常細(xì)胞嚴(yán)格,一般常用的 RPMIl640、 DMEM、Mc-Coy
等培養(yǎng)基等皆可用于腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。腫瘤細(xì)胞對(duì)血清的需求比正常細(xì)胞低,正常細(xì)胞培養(yǎng)不
加血清不能生長(zhǎng),腫瘤細(xì)胞在低血清培養(yǎng)基中也能生長(zhǎng)。腫瘤細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)環(huán)境適應(yīng)性較大,
是因腫瘤細(xì)胞有自泌 性產(chǎn)生促生長(zhǎng)物質(zhì)之故。但這并不說(shuō)明腫瘤細(xì)胞*不需
要這些成分。按不同細(xì)胞需要不同的生長(zhǎng)因子;腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞之間、腫瘤細(xì)胞與腫瘤
細(xì)胞之間對(duì)生長(zhǎng)因子的需求都存在著差異。但大多數(shù)腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)中仍需要生長(zhǎng)因子。有的
還需特異性生長(zhǎng)因子〔如乳腺癌細(xì)胞等)??傊囵B(yǎng)腫瘤細(xì)胞仍需加血清和相關(guān)生長(zhǎng)因子培養(yǎng)
更易成功。
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