人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）酶聯(lián)免疫分析

試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

本試劑盒僅供研究使用。

檢測(cè)范圍：                                                          96T

2pg/ml-48pg/ml

使用目的：

本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中早期分泌抗原靶6（ESAT-6）含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）水平。用純化的人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入早期分泌抗原靶6（ESAT-6），再與HRP標(biāo)記的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的早期分泌抗原靶6（ESAT-6）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人早期分泌抗原靶6（ESAT-6）濃度。

試劑盒組成

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1瓶

8

標(biāo)準(zhǔn)品（96pg/ml）

0.5ml×1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說(shuō)明書(shū)

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

48pg/ml

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

24pg/ml

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

12pg/ml

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

6pg/ml

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3pg/ml

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

操作程序總結(jié)：

計(jì)算

  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請(qǐng)避光保存。

7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個(gè)月

小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒 
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒
小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒 
小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒
小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒
小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒
小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
小鼠促黃體激素(LH)ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒
小鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA試劑盒
小鼠丙二醛(MDA)ELISA試劑盒
小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA試劑盒
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒
小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISA試劑盒
小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒
小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒
小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒
小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒
小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒
小鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA試劑盒
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
小鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒
小鼠過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4a(C4a)ELISA試劑盒
小鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒
小鼠補(bǔ)體片斷(C)ELISA試劑盒
小鼠補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒
小鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
小鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒
小鼠組織蛋白去乙?；?HD)ELISA試劑盒
小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒
小鼠雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒
小鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA試劑盒
小鼠睪酮(T)ELISA試劑盒
小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒 
小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒
小鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒
小鼠雌二醇(E2)ELISA試劑盒
小鼠皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA試劑盒
小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA試劑盒
小鼠葡萄糖依賴(lài)性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒
小鼠糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒
小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(TRAb)ELISA試劑盒
小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
小鼠白介素27(IL-27)ELISA試劑盒
小鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒
小鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA試劑盒
小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
小鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(vWF)ELISA試劑盒
小鼠前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒
小鼠N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒
小鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒
小鼠抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒
小鼠凝血酶受體(TR)ELISA試劑盒
小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒
小鼠β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒
小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒
小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒
小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒
小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒
小鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
小鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA試劑盒
小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒
小鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒
小鼠半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒
小鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒
小鼠乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA試劑盒
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒
小鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒
小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺過(guò)氧化物酶(TPO)ELISA試劑盒
小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒
小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒
小鼠胰島素原(PI)ELISA試劑盒
小鼠抗IgE受體抗體ELISA試劑盒
小鼠抗IVIgG抗體ELISA試劑盒
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA試劑盒
小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒
小鼠p53(p53)ELISA試劑盒
小鼠環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA試劑盒
小鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
小鼠組胺(HIS)ELISA試劑盒
小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒
小鼠脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒
小鼠熱休克蛋白40(Hsp-40)ELISA試劑盒
小鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒
小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒
小鼠雌激素(E)ELISA試劑盒
小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒
小鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒
小鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒
小鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒
小鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒
小鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153ELISA試劑盒
小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA試劑盒
小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒
小鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒
小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
小鼠絨毛膜促性腺激素β(β-CG)ELISA試劑盒
小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒
小鼠脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒
小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒
小鼠內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒
小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA試劑盒
小鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒
小鼠胃動(dòng)素(MTL)ELISA試劑盒
小鼠生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α)ELISA試劑盒
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(lèi)(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA試劑盒
小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒
小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
小鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒
小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA試劑盒
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
小鼠促性腺激素釋放激素(GnRH)ELISA試劑盒
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA試劑盒
小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA試劑盒
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒
小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒
小鼠淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒
小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒
小鼠膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA試劑盒
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
小鼠維生素C(VC)ELISA試劑盒
小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒
小鼠維生素B6(VB6)ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA試劑盒
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒
小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒
小鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒
小鼠血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒
小鼠乙酰膽堿(ACH)ELISA試劑盒
小鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
大鼠活化素A受體抗體(ACV-RAb)ELISA試劑盒
大鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒
大鼠血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)ELISA試劑盒
大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒
大鼠甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒 
大鼠白介素7(IL-7)ELISA試劑盒
大鼠絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒