一、基本原理
酵母菌的子囊孢子生成與否及其形狀,是酵母分類上的重要依據(jù)。一部分酵母菌只有當(dāng)它在zui適條件下,才能觀察到形成的子囊孢子,不同種屬的酵母菌,形成子囊孢子的條件不同。葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基特別有利于釀酒酵母子囊孢子的形成。本實(shí)驗(yàn)用生長(zhǎng)在此培養(yǎng)基上的釀酒酵母為材料,進(jìn)行子囊孢子的觀察。
二、器材
釀酒酵母;
呂氏堿性美藍(lán)染液,石炭酸復(fù)紅染液,3%的酸性酒精,孔雀綠芽孢染液,麥芽汁瓊脂斜面培養(yǎng)基,葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基等。
三、操作步驟
1.將釀酒酵母先移種到新鮮麥芽汁瓊脂斜面上,25℃培養(yǎng)24小時(shí)左右。如此活化二次后,備用。
2.用接種環(huán)取活化后的培養(yǎng)物,接種到葡萄糖-醋酸鹽斜面上,25℃培養(yǎng)二周左右。
3.用接種環(huán)挑取少許生長(zhǎng)在葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基上的釀酒酵母于載玻片上,制成涂片,干燥、固定。
4.用兩種方法進(jìn)行染色。一種方法是加石炭酸復(fù)紅染液于固定涂片處,在火焰上加熱5—10分鐘(不能沸騰),用酸性酒精沖洗30—60秒鐘,再用水洗去酒精,加呂氏堿性美藍(lán)染液數(shù)滴,數(shù)秒鐘后用水洗去,水干后置顯微鏡下觀察,結(jié)果孢子為赤色,菌體為青色;另一種方法是用孔雀綠芽孢染液進(jìn)行染色,但無(wú)需加熱,干后置油鏡下觀察子囊孢子。
四、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
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