固定液選擇的標(biāo)準(zhǔn):
(1)好地保持細胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu);
(2)大限度地保存抗原的免疫活性。一些含重金屬的固定液在免疫組化和細胞化學(xué)技術(shù)中是禁用的;
(3)不要用可能帶有自發(fā)熒光的固定劑,如帶有苦味酸的固定劑,還有甲醛升汞固定液,會使上皮細胞產(chǎn)生非特異性熒光;
(4)固定劑的選擇、固定時間、溫度和PH值都會影響實驗結(jié)果。
常用的幾種固定液:
(1)4%中性甲醛固定液:能滿足常規(guī)HE及免疫組化、PCR等工作(Job)。中性甲醛是以PH7.2-7.4的磷酸緩沖液為溶劑配制的,其固定效果及對組織抗原性的保存均優(yōu)于一般的4%甲醛固定液。此固定液配制后應(yīng)密封并保存在陰涼處,保存時間不超過一個月。
甲醛(40%) 100ml
無水磷酸氫二鈉 6.5g
磷酸二氫鈉 4.0g
蒸餾水 900ml
(2)乙醇固定液:使用時以80%-95%的濃度為宜,具有硬化、固定、脫水等作用,對組織滲透力較弱,因此很少單獨使用,但其保存組織中的核酸強于中性甲醛,故常用于有核酸操作的實驗或檢查,假如用于證實尿酸結(jié)晶和保存糖原,可用于100%乙醇固定組織。
(3)4%多聚甲醛固定液:主要用于培養(yǎng)細胞的固定。
混合固定液
(1)乙醇-甲醛(乙醇-福爾馬林,AF)固定液:適用于皮下組織中肥大細胞的固定。該固定液有固定兼脫水作用,固定后的標(biāo)本可直接入95%乙醇脫水。
甲醛(40%) 100ml
95%乙醇 900ml
(2)B5(醋酸鈉-升汞-甲醛)固定液:多用于固定淋巴組織。染色前應(yīng)進行脫汞沉淀處理。
無水醋酸鈉 1.25g
升汞 6.0g
蒸餾水 90ml
使用前加入甲醛 10ml
(3)Bouin固定液:非凡適用于睪丸活檢組織的固定。Bouin液對組織固定較均勻,收縮很少,不會使組織變硬變脆。需現(xiàn)配現(xiàn)用。
飽和苦味酸水溶液(約1.22%) 75ml
甲醛 25ml
冰醋酸 5ml
(4)Carnoy固定液:穿透能力強,可很好的固定細胞質(zhì)和細胞核,非凡適用于固定外膜致密的組織,也適用于糖原及尼氏小體的固定。
(5) Zenker固定液:經(jīng)此液固定的標(biāo)本,細胞核和細胞質(zhì)染色頗為清楚,但成本較高且需非凡處理汞。該固定液要避免接觸陽光,以免引起化學(xué)變化而失效。
北京索萊寶科技有限公司
:
:
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。