、食品大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片LZ-7原理及適用范圍
將乳糖膽鹽選擇性培養(yǎng)基和TTC顯色劑加載在紙片上,經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長(zhǎng)并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽(yáng)性,記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù),根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。 食品大腸菌群檢驗(yàn)紙片法與國(guó)標(biāo)法中的九管法相對(duì)應(yīng),將原來(lái)幾步的試驗(yàn)簡(jiǎn)化為一步,時(shí)間由78h縮短為24h以?xún)?nèi),省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時(shí)可以打開(kāi)包裝進(jìn)行抽樣檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)MPN計(jì)數(shù)法(GB/T 4789.3--2010)。
適用于各類(lèi)食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測(cè)定。
2、食品大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片LZ-7操作方法
2.1、樣品處理:按無(wú)菌操作稱(chēng)取樣品25g(或25mL)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣瓶或均質(zhì)杯中,經(jīng)充分振搖做成1:10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應(yīng)在6.5~7.5之間,必要時(shí)用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調(diào)節(jié)。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖試管制成1:100的樣品勻液。根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì),按上述操作,一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次,換一支1mL無(wú)菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢,全過(guò)程不得超過(guò)15min。
2.2、接種
2.2.1、選取兩個(gè)稀釋度進(jìn)行接種,普通食品一般采用1:10和1:100這兩個(gè)稀釋度,飲料采用原液和1:10兩個(gè)稀釋度。本品每份由三片大紙片(接10mL,袋中二片疊放算作一大片),六片小紙片(接1mL)組成。
2.2.2、用滅菌吸管吸取10mL 1:10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中(相當(dāng)于接樣品1g),吸透后平放,做三個(gè)重復(fù)。再用1mL滅菌吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當(dāng)于接樣品0.1g),做三個(gè)重復(fù)。再另取一支1mL滅菌吸管吸取1mL 1:100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中(相當(dāng)于接樣品0.01g),做三個(gè)重復(fù)。
2.3、培養(yǎng):將接種好的紙片(可疊放)放入36℃±1℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)15~24h。
3、食品大腸菌群快速檢驗(yàn)紙片LZ-7大腸菌群zui可能數(shù)(MPN)的報(bào)告
3.1 若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽(yáng)性紙片。紙片保持紫藍(lán)色不變或在紫藍(lán)色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn),但周?chē)鷽](méi)有黃色均為大腸菌群陰性紙片。
3.2 記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù),根據(jù)《食品飲料大腸菌群MPN表》查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。
3.3 如接種的*個(gè)梯度為原液,應(yīng)將表上查出的結(jié)果除以10。
4、注意事項(xiàng)
新的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所用的單位改為每克(或毫升)檢樣中大腸菌群zui可能數(shù),標(biāo)準(zhǔn)的接種量為0.333g(mL),MPN表也是由此而設(shè)計(jì)。而使用本品的標(biāo)準(zhǔn)接種量為3.33g(mL),大紙片接種10mL 1:10樣品勻液相當(dāng)于1g樣品,因而表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍。飲料樣品的接種量為33.3mL,大紙片接種10mL樣品原液,表內(nèi)數(shù)字應(yīng)降低100倍。
5、保存條件
本產(chǎn)品需存放在4℃~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,在拆封前將整包回溫至室溫。
食品、飲料大腸菌群(MPN)檢索表
陽(yáng)性紙片數(shù) | MPN | 95%可信限 | 陽(yáng)性紙片數(shù) | MPN | 95%可信限 | ||||||
0.10 | 0.01 | 0.001 | 下限 | 上限 | 0.10 | 0.01 | 0.001 | 下限 | 上限 | ||
0 0 0 0 | 0 0 1 1 | 0 1 0 1 | <3.0 3.0 3.0 6.1 | - 0.15 0.15 1.2 | 9.5 9.6 11 18 | 2 2 2 2 | 2 2 2 3 | 0 1 2 0 | 21 28 35 29 | 4.5 8.7 8.7 8.7 | 42 94 94 94 |
0 0 1 1 | 2 3 0 0 | 0 0 0 1 | 6.2 9.4 3.6 7.2 | 1.2 3.6 0.17 1.3 | 18 38 18 18 | 2 3 3 3 | 3 0 0 0 | 1 0 1 2 | 36 23 38 64 | 8.7 4.6 8.7 17 | 94 94 110 180 |
1 1 1 1 | 0 1 1 2 | 2 0 1 0 | 11 7.4 11 11 | 3.6 1.3 3.6 3.6 | 38 20 38 42 | 3 3 3 3 | 1 1 1 1 | 0 1 2 3 | 43 75 120 160 | 9 17 37 40 | 180 200 420 420 |
1 1 2 2 | 2 3 0 0 | 1 0 0 1 | 15 16 9.2 14 | 4.5 4.5 1.4 3.6 | 42 42 38 42 | 3 3 3 3 | 2 2 2 2 | 0 1 2 3 | 93 150 210 290 | 18 37 40 90 | 420 420 430 1000 |
2 2 2 2 | 0 1 1 1 | 2 0 1 2 | 20 15 20 27 | 4.5 3.7 4.5 8.7 | 42 42 42 94 | 3 3 3 3 | 3 3 3 3 | 0 1 2 3 | 240 460 1100 <1100 | 42 90 180 420 | 1000 2000 4100 - |
注1:本表采用3個(gè)稀釋度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g(或0.01ml)、和0.001g(或0.001ml)〕,每個(gè)稀釋度接種3片。 注2:表內(nèi)所列檢樣量如改用1g(或1ml)、0.1g(或0.1ml)、和0.01g(或0.01ml)時(shí),表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)降低10倍;如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g(或0.001ml)、和0.0001g(或0.0001ml)時(shí),則表內(nèi)數(shù)字應(yīng)相應(yīng)增高10倍,其余類(lèi)推 |
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