地高辛單克隆抗體 上海圻明生物科技有限公司長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)。

（一）動(dòng)物的選擇與免疫
1．動(dòng)物的選擇 純種BALB/C 小鼠，較溫順，離窩的活動(dòng)范圍小，體弱，
食量及排污較小，一般環(huán)境潔凈的實(shí)驗(yàn)室均能飼養(yǎng)成活。目前開展雜交瘤技術(shù)的
實(shí)驗(yàn)室多選用純種BALA/C 小鼠。
2．免疫方案 選擇合適的免疫方案對(duì)于細(xì)胞融合雜交的成功，獲得高質(zhì)
量的McAb 至關(guān)重要。一般在融合前兩個(gè)月左右根據(jù)確立免疫方案開始初次免疫，
免疫方案應(yīng)根據(jù)抗原的特性不同而定。
（1）可溶性抗原免疫原性較弱，一般要加佐劑，半抗原應(yīng)先制備免疫原，再加
佐劑。常用佐劑：福氏*佐劑、福氏不*佐劑。
初次免疫抗原1～50μg 加福氏*佐劑皮下多點(diǎn)注射或脾內(nèi)注射
（一般0.8～1ml,0.2ml/點(diǎn)）
↓3 周后
第二次免疫劑量同上，加福氏不*佐劑皮下或ip（腹腔內(nèi)注射）
（ip 劑量不宜超過(guò)0.5ml）
↓3 周后
第三次免疫劑量同一，不加佐劑，ip（5～7 天后采血測(cè)其效價(jià)）
↓2～3 周
加強(qiáng)免疫，劑量50～500μg 為宜，ip 或iv（靜脈內(nèi)注射）
↓3 天后
取脾融合
目前，用于可溶性抗原（特別是一些弱抗原）的免疫方案也不斷有所更新，如：
①將可溶性抗原顆粒化或固相化，一方面增強(qiáng)了抗原的免疫原性，另一方面可降
低抗原的使用量。②改變抗原注入的途徑，基礎(chǔ)免疫可直接采用脾內(nèi)注射。③使
用細(xì)胞因子作為佐劑，提高機(jī)體的免疫應(yīng)答水平，增強(qiáng)免疫細(xì)胞對(duì)抗原的反應(yīng)性。
（2）顆粒抗原免疫性強(qiáng)，不加佐劑就可獲得很好的免疫效果。以細(xì)胞性抗原為
例，免疫時(shí)要求抗原量為1～2×107 個(gè)細(xì)胞。
初次免疫 1×107/0.5ml ip
↓2～3 周后
第二次免疫 1×107/0.5ml ip
↓3 周后
加強(qiáng)免疫（融合前三天）1×107/0.5ml ip 或iv
↓
取脾融合

（二）細(xì)胞融合