研究細胞周期
上海滬峰是由留學(xué)美國多年的資深學(xué)者創(chuàng)辦的一家*企業(yè),與中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、華中農(nóng)業(yè)大學(xué)、哈爾濱獸醫(yī)研究所等多家高校及生物技術(shù)研究機構(gòu)建立了合作關(guān)系。公司以開發(fā)的動物疾病診斷試劑、食品安全檢測試劑、人體疾病診斷試劑、環(huán)境監(jiān)測試劑、新型酶制劑、微生物制劑、蛋白質(zhì)產(chǎn)品、核苷酸產(chǎn)品、綠色水產(chǎn)藥品、小分子抗原抗體、基因重組抗原抗體等生物化學(xué)制品為主,以*的化企業(yè)經(jīng)營理念、雄厚的研發(fā)實力、規(guī)范化的生產(chǎn)標(biāo)準、健全的銷售網(wǎng)絡(luò)、完善的技術(shù)服務(wù)體系和廣闊的國內(nèi)外合作網(wǎng)絡(luò)服務(wù)于,致力于生物制劑在的產(chǎn)業(yè)化。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor是基于兩個細胞周期調(diào)控蛋白geminin和Cdt1,它們分別與綠色和紅色熒光蛋白相融合。Cdt1和geminin蛋白的降解是時間上調(diào)控的,這樣G1期只存在Cdt1,G1/S期存在兩種蛋白,而S、G2和M期只存在geminin。因此,細胞核的熒光就從紅色(G1)變成綠色(S、G2、M),為監(jiān)控細胞周期進程提供了一種簡單的方法。
FUCCI系統(tǒng)是基于BacMam 2.0技術(shù),它利用桿狀病毒來實現(xiàn)哺乳動物細胞的轉(zhuǎn)導(dǎo)和瞬時表達。BacMam 2.0大大提高了這種基因?qū)肫脚_的效率和實用性。過去與BacMam 1.0不兼容的細胞類型(神經(jīng)元),或轉(zhuǎn)導(dǎo)效果不佳(一些干細胞、CHO)的細胞類型,現(xiàn)在也能通過簡單的一步過程定量轉(zhuǎn)導(dǎo)。BacMam 2.0融合了新元件,大大增強了轉(zhuǎn)導(dǎo)效率和表達水平,故性能改善。
Premo™ FUCCI Cell Cycle Sensor實現(xiàn)了細胞周期進程和細胞分裂的活細胞成像,它也與固定和透化處理兼容。這種細胞周期傳感器是即用型的,操作過程也很簡單——只需將Premo™ FUCCI試劑加入您的細胞,孵育過夜,并利用熒光顯微鏡或流式細胞儀觀察即可。
追蹤DNA合成
Click-iT® EdU assay則是我們常用的BrdU分析的替代。在DNA合成過程中,核苷類似物EdU(5-乙炔-2’-脫氧尿苷)摻入新生的DNA鏈中。EdU不是通過抗體檢測,而是基于一個click反應(yīng)——銅催化的疊氮化物和炔烴之間的共價反應(yīng)。EdU核苷中含有炔烴,而Alexa Fluor或Pacific Blue熒光基團上含有疊氮化物。利用成像技術(shù)、流式細胞術(shù)或高內(nèi)涵分析即可判定群體中S期細胞的比例。
Click-iT® EdU標(biāo)記的一個主要優(yōu)勢在于熒光疊氮化物(分子量<~1,000)的體積遠小于BrdU抗體(分子量~150,000),這樣EdU可在溫和條件下?lián)饺耄A袅丝乖暾?,從而實現(xiàn)了下游的抗體分析。與BrdU檢測需要苛刻條件不同,Click-iT®檢測試劑只需要標(biāo)準的固定和透化即可。
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